2D 젤 전기 영동이란 무엇입니까?
2 차원 (2D) 겔 전기 영동은 과학자들이 두 개의 다른 축을 따라 단백질 밴드를 먼저 분리하여 단백질 혼합물을 분해하고 분석하는 데 사용하는 방법입니다. 복잡하거나 두꺼운 단백질의 혼합물, 종종 겹치는 크기의 단백질을 다룰 때 가장 자주 사용되는 기술입니다. 2D 겔 전기 영동은 일차원 겔 전기 영동과 다르다. 전자의 방법은 두 가지 다른 단백질 특성에 기초한 단백질의 분리를 사용하는 반면, 일차원 겔 전기 영동은 일반적으로 단백질 크기와 같은 단일 특성에 기초하여 단백질을 분리하기 때문이다.
젤 전기 영동은 종종 DNA와 같은 많은 생물학적 분자가 전하를 가지고 있다는 사실을 이용하여 분자를 분리하기 위해 연구에서 사용됩니다. 이 사실은 과학자들의 이점에 사용될 수있다. 하전 된 분자는 다공성 이온 성 겔에 전압 구배를 적용함으로써 아가 로스와 같은 다공성 기판을 통해 크기에 의해 분리 될 수 있기 때문이다. 시간이 지남에 따라 분자는 분자의 자연 전하와 반대 인 전하쪽으로이 겔을 통과하게됩니다. 소분자 및 고전 하 분자는 모두 약하게 하전 된 큰 분자 또는 단백질보다 빠르게 움직입니다. 2D 겔 전기 영동에서, 구배를 생성하는 단일 특성을 통해 단백질을 분리 한 후, 겔을 옆으로 돌려 제 2 특성에 기초하여 이전에 생성 된 밴드를 분리 할 수있다.
2D 겔 전기 영동은 종종 단백질 응집체가 단일 성분 단백질로 분리 될 수있는 하나의 특성으로서 단백질의 분자 전하를 사용한다. 단백질 질량은 2D 겔 전기 영동에서 단백질을 분리하는 데 사용되는 또 다른 일반적인 특성입니다. 단백질이 일차원 겔 전기 영동에서 단일 레인을 통해 겔상에서 진행된 후, 겔은 원심 분리기에서 회전 될 수 있으며, 더 무거운 단백질은 더 작고 덜 무거운 단백질보다 더 빨리 아래로 내린다. 당김의 방향은 전압 구배를 통한 전하로의 인력으로 인해 겔을 통해 단백질이 인발되는 방향에 수직이다.
전기 영동은 단백질 태그와 같은 합성 된 특성에 기초한 단백질의 분리를 포함하여 분자 연구에서 많은 용도로 사용됩니다. 단백질이 다른 분자로 태그 될 때 특징적인 질량에 기초한 단백질 분리가 또한 사용된다. 태그가 붙은 단백질은 태그가없는 단백질보다 젤을 통해 더 쉽게 떨어질 수 있기 때문에이 기술은 이러한 단백질 복합체와 함께 사용될 수 있습니다.
실험실의 많은 분리 젤은 아가 로스로 만들어 지지만, 2D 겔 전기 영동에 의한 단백질 분리는 폴리 아크릴 아미드 겔에서 가장 잘 수행됩니다. 이러한 유형의 젤은 Western Blots 및 기타 단백질 크기 기반 분석에 사용됩니다. Agarose는 DNA 세그먼트를 분리하는 데 더 자주 사용됩니다.