蛍光in situハイブリダイゼーション技術とは何ですか？

蛍光in situハイブリダイゼーションは、蛍光in situハイブリダイゼーションとしても知られており、より一般的には魚と呼ばれます。これは、蛍光色素で標識されたDNAの短い鎖を使用して遺伝的異常を検出する手法です。魚は、研究者が染色体、染色体の一部、または特定の遺伝子を迅速かつ正確に視覚化することを可能にします。これは、特定の疾患、特に癌の予後と治療を決定するためによく使用されます。

魚は、染色体に異常があるかどうかを判断するために使用されます。これには、2つの染色体がセグメントを切り替えた染色体の欠失、再配列、または転座が含まれる場合があります。魚はまた、研究者が特定の遺伝子を視覚化することもできます。特定の遺伝子が存在するかどうか、染色体上に配置されているかどうか、複数のコピーが存在するかどうかを判断できます。これは遺伝子マッピングと呼ばれます。

人の遺伝的構成は、すべての細胞の核にあるDNAに含まれています。 DNAにはあります互いに無料の2つのストランド。言い換えれば、彼らは正確に一致する塩基対と呼ばれる分子を持っています。 Genes are segments of DNA that have a particular sequence of base pairs and are located on specific areas of chromosomes.遺伝子は継承され、細胞がどのように機能するかを決定しますが、DNA塩基ペアの配列が変化すると変異する可能性があります。

蛍光in situハイブリダイゼーション技術は、DNA鎖の無料の性質を利用しています。調査員は最初にプローブを作成します。これは、研究者が探している遺伝的配列を補完するDNAの短い単一の鎖です。プローブは、蛍光色素に標識または取り付けられます。

腫瘍生検などの病気の組織からの細胞は、通常、魚が検査するサンプルを構成します。サンプルは、細胞の核内のDNAを変性させるように加熱されます。これはそれを意味しますサンプル細胞内の二重鎖が分解して単一の鎖を形成します。その後、特定の魚のプローブがサンプルでハイブリダイズされます。言い換えれば、プローブのシングルストランドが導入され、変性サンプルセルに無料の単一鎖を融合します。

特別な蛍光顕微鏡を使用して、研究者はサンプルを調べます。特定の遺伝子または染色体がサンプル細胞に存在する場合、それはより暗い背景に対する蛍光光として現れます。研究者は、遺伝子が存在するかどうか、そしてもしそうなら、各細胞に遺伝子のコピーの数を簡単に確認できます。研究者が遺伝子の場所を探している場合、彼または彼女は染色体のどこにあるかを見ることができます。蛍光色素は非常に低いレベルの光を放出するため、通常の光顕微鏡を魚と一緒に使用することはできません。

プローブでのDNAハイブリダイゼーションの使用は、1960年代に最初に達成されました。ただし、プローブは蛍光ではなく放射性物質で標識されましたNTのもの。これにはいくつかの問題がありました。放射性物質は本質的に不安定で危険であり、廃棄のために特別なプロトコルが必要です。また、ハイブリダイズプローブによって放出される放射性信号を測定するのに長い時間がかかります。蛍光in situハイブリダイゼーション技術は、これらの障害のほとんどを克服します。

調査員が探している遺伝子を知っている場合、魚はそれを見つけるのが速く正確です。細胞が積極的に分割されていなくても、魚を実行することもでき、染色体の異常に関するより具体的な情報を提供します。カロタイピングなどのより従来の技術は、細胞内の染色体の数とサイズを調査員に伝えるだけです。

蛍光in situハイブリダイゼーションには欠点があります。魚の鍵は、遺伝子の塩基対シーケンスおよび/または位置を知ることであるため、一般的なスクリーニングツールとして使用することはできません。また、他の技術よりも高価であり、すべての研究所で利用できない場合があります。病院。

蛍光in situハイブリダイゼーションの利点と短所は、例で最もよく説明されています。魚は、乳がん診断で日常的に使用され、患者がHER2と呼ばれる遺伝子の複数のコピーを持っているかどうかを判断します。これは通常、乳がんのより攻撃的な形態を示し、患者は治療の一部として特定の薬を投与する必要があることを示しています。 HER2遺伝子の塩基対配列と染色体位置がわかっているため、魚はこれに使用できます。対照的に、魚を使用して、未知の遺伝子または遺伝子が乳がんを引き起こしたものを判断したり、一般的に乳がんをスクリーニングしたりすることはできません。