Wat is een fluorescerende microscoop?
Een fluorescentiemicroscoop is een apparaat dat wordt gebruikt om de hoeveelheid en het type fluorescentie te onderzoeken die door een monster wordt uitgezonden. In tegenstelling tot een conventionele microscoop creëert een fluorescerende microscoop leesbare beelden door bestraling en filtratie in plaats van traditionele reflectie. Dit type microscoop is een essentieel hulpmiddel bij cellulair en genetisch onderzoek, inclusief bij de productie van driedimensionale afbeeldingen van microben.
Fluorescentie is een fenomeen dat optreedt wanneer een materiaal wordt geëxciteerd of actiever wordt door blootstelling aan straling. Terwijl het materiaal begint te kalmeren, wordt de door de opwinding gecreëerde energie als licht uitgestraald. In sommige stoffen is fluorescentie een natuurlijk voorkomende eigenschap, wat betekent dat er geen externe bestraling nodig is om de lichtemissie te veroorzaken. Andere stoffen zijn niet van nature fluorescerend, maar kunnen dat worden als ze worden opgewekt door de juiste golflengte van licht. Een fluorescerende microscoop is het primaire middel voor het opwinden en observeren van dergelijke materialen.
In een fluorescentiemicroscoop kan een monster worden geraakt met licht dat specifiek is geselecteerd om fluorescentie te creëren. Met behulp van een filter laat de microscoop alleen de gekozen golflengte het monster bereiken om de beste reactie te garanderen. De lichtbron die wordt gebruikt om fluorescentie te creëren, kan variëren, afhankelijk van het type fluorescentiemicroscoop en monster. Een van de meest voorkomende lichtbronnen die worden gebruikt bij fluorescentiemicroscopie is een kwikdamplamp, die een extreem helder licht creëert. Een ander vaak gebruikt type licht is de xenon-booglamp, die een licht produceert dat vergelijkbaar is met daglicht. In sommige situaties kunnen lasers in plaats van traditionele lampen worden gebruikt.
Als het monster eenmaal is geëxciteerd, is een tweede filter nodig om de initiële golflengte van licht te blokkeren. Bekend als een bundelsplitser, reflecteert dit filter licht met een lagere golflengte dan die werd gebruikt om het monster te exciteren. Dit betekent dat het in de microscoop gecreëerde beeld niet wordt vervuild door de initiële lichtbron, omdat het licht met hogere golflengte door de straalsplitser zal gaan. Het uiteindelijke gemaakte beeld reflecteert dus alleen het fluorescerende licht van het monster zelf.
De fluorescentiemicroscoop heeft veel verschillende toepassingen in de hele wetenschappelijke wereld. Meestal wordt het gebruikt in de studie van cellen en micro-organismen, omdat het specifieke details in kleine monsters met een hoge mate van nauwkeurigheid en duidelijkheid kan lokaliseren. Medische en biologische onderzoekers gebruiken vaak fluorescentiemicroscopie om DNA en RNA te bestuderen, leren over het gedrag en de structurele details van cellen en bestuderen antilichamen om de ziekte beter te begrijpen.