Co to jest mikroskop fluorescencyjny?
Mikroskop fluorescencyjny to urządzenie stosowane do badania ilości i rodzaju fluorescencji emitowanej przez próbkę. W przeciwieństwie do konwencjonalnego mikroskopu, mikroskop fluorescencyjny tworzy czytelne obrazy dzięki zastosowaniu naświetlania i filtracji, a nie tradycyjnego odbicia. Ten typ mikroskopu jest niezbędnym narzędziem w badaniach komórkowych i genetycznych, w tym w produkcji trójwymiarowych obrazów drobnoustrojów.
Fluorescencja jest zjawiskiem, które występuje, gdy materiał staje się wzbudzony lub bardziej aktywny przez ekspozycję na promieniowanie. Gdy materiał zaczyna się uspokajać, energia wytworzona przez podniecenie jest emitowana jako światło. W niektórych substancjach fluorescencja jest naturalnie występującą właściwością, co oznacza, że zewnętrzne promieniowanie nie jest konieczne, aby spowodować emisję światła. Inne substancje nie są naturalnie fluorescencyjne, ale mogą stać się takie, gdy są wzbudzone przez prawidłową długość fali światła. Mikroskop fluorescencyjny jest podstawowym sposobem ekscytującym i obserwującym takie materiały.
W mikroskopie fluorescencyjnym próbkę można uderzyć światłem specjalnie dobranym do wytworzenia fluorescencji. Za pomocą filtra mikroskop pozwala dotrzeć do próbki tylko wybranej długości fali, aby zapewnić najlepszą reakcję. Źródło światła użyte do wytworzenia fluorescencji może się różnić w zależności od rodzaju mikroskopu fluorescencyjnego i próbki. Jednym z najczęstszych źródeł światła stosowanych w mikroskopii fluorescencyjnej jest lampa rtęciowa, która wytwarza wyjątkowo jasne światło. Innym często stosowanym rodzajem światła jest ksenonowa lampa łukowa, która wytwarza światło podobne do światła dziennego. W niektórych sytuacjach zamiast lasera można zastosować lasery.
Po pobudzeniu próbki konieczny jest drugi filtr, aby zablokować początkową długość fali światła. Filtr ten, znany jako dzielnik wiązki, odbija światło o długości fali mniejszej niż użyta do wzbudzenia próbki. Oznacza to, że obraz utworzony w mikroskopie nie zostanie zanieczyszczony przez początkowe źródło światła, ponieważ światło o większej długości fali przejdzie przez rozdzielacz wiązki. Tak więc powstały obraz końcowy będzie odbijał tylko światło fluorescencyjne z samej próbki.
Mikroskop fluorescencyjny ma wiele różnych zastosowań w całym świecie naukowym. Najczęściej jest on wykorzystywany w badaniach komórek i mikroorganizmów, ponieważ może precyzyjnie określić konkretne szczegóły w małych próbkach z dużą dokładnością i klarownością. Badacze medyczni i biologiczni często używają mikroskopii fluorescencyjnej do badania DNA i RNA, poznawania zachowania i szczegółów strukturalnych komórek oraz badania przeciwciał w celu lepszego zrozumienia choroby.