Co to jest mikrodyssekcja laserowa?
Mikrodyssekcja laserowa (LCM) to technika stosowana w laboratoriach biologicznych, która umożliwia technikom usunięcie określonego obszaru lub typu komórek z próbki. Odwodniona próbka komórkowa jest umieszczana na scenie mikroskopu, a następnie na jej części umieszczana jest cienka warstwa materiału termoplastycznego, takiego jak octan etylenowinylu. Gdy wiązka laserowa jest skupiona na wybranych komórkach, warstwa błony topi się i wiąże się z nimi, a komórki te zostają osadzone w filmie po usunięciu. Proces ten znany jest również jako mikrodyssekcja laserowa (LMD).
Pierwotnie stworzona przez National Cancer Institute, laserowa mikrodyssekcja jest używana do badania różnych rodzajów nowotworów oraz do analizy i identyfikacji charakteru różnych rodzajów nowotworów. Umożliwia badanie różnych części guzów i ich stadiów rozwoju. Technika ta jest również wykorzystywana do różnych rodzajów analizy genetycznej oraz do badania złożonych komórek mózgowych i immunologicznych. Można go stosować w połączeniu z innymi eksperymentami z ekspresją DNA i genów.
LCM nie jest jedynym rodzajem procedury mikrodyssekcji. Inny rodzaj systemu do mikrodyssekcji za pomocą lasera wykorzystuje tylko laser do oddzielania próbek komórek. Nie ma kontaktu między komórkami a jakimkolwiek rodzajem materiału, a energia samego lasera przenosi mikrodyssekcjonowane komórki do naczynia na próbki. Inny system usuwa niechciane komórki za pomocą światła ultrafioletowego, którego wypełnienie trwa dłużej, ale również nie wymaga użycia folii polimerowej.
Ze względu na jego zdolność do uzyskiwania czystych próbek komórek do analizy molekularnej, mikrodyssekcja przechwytywania laserowego została ulepszona poprzez różne badania i zmiany. Stwierdzono, że użycie zamrożonej tkanki daje lepsze wyniki. Na szkiełkach mikroskopowych zastosowano kleje, ale zamiast pomagać w przyłączaniu komórek, utrudnia to pobieranie określonych próbek tkanek. Obecność wilgoci ma negatywny wpływ na przenoszenie komórek na błonę, dlatego podczas techniki preferowane są odwodnione skrawki tkanek.
Pomimo swoich zalet mikrodyssekcja laserowa ma kilka wad. Koszty mikroskopów, komputerów i oprogramowania mogą być wysokie. Próbki mogą być również trudne do zobaczenia, ponieważ szkiełko nakrywkowe mikroskopu nie jest używane, co jest problemem w przypadku wielu podobnych technik. Naukowcy również potrzebują więcej czasu na przeprowadzenie procesu, ale czystość próbek uzyskanych za pomocą LCM nadal przewyższa zalety innych metod.