Co je laserová mikrodisekce?
Mikrodisekce laserem (LCM) je technika používaná v biologických laboratořích, která technikům umožňuje odstranit specifikovanou oblast nebo typ buněk ze vzorku. Dehydratovaný buněčný vzorek se umístí na stolek mikroskopu a na jeho část se umístí tenká vrstva termoplastického materiálu, jako je ethylenvinylacetát. Když je laserový paprsek zaostřen na vybrané buňky, vrstva membrány se s nimi roztaví a spojí a tyto buňky se po vyjmutí vloží do filmu. Tento proces se také nazývá laserová mikrodisekce (LMD).
Mikrodisekce laserového záchytu, kterou původně vytvořil National Cancer Institute, se používá ke studiu různých typů nádorů ak analýze a identifikaci povahy různých typů nádorů. Umožňuje studovat různé části nádorů a jejich stádia vývoje. Tato technika se také používá pro různé druhy genetické analýzy a pro studium složitých mozkových a imunologických buněk. Může být použit ve spojení s dalšími experimenty s DNA a genovou expresí.
LCM není jediným typem mikrodisekční procedury. Jiný typ laserového záchytného mikrodisekčního systému používá k oddělení vzorků buněk pouze laser. Nedochází k žádnému kontaktu mezi buňkami a jakýmkoli typem materiálu a energie samotného laseru přesune mikrodisekované buňky do vzorkové nádoby. Jiný systém odstraňuje nežádoucí buňky ultrafialovým světlem, které trvá déle, ale také nevyžaduje použití polymerního filmu.
Díky své schopnosti získat čisté vzorky buněk pro molekulární analýzu byla mikrodisekce laserového záchytu vylepšena různými studiemi a změnami. Bylo zjištěno, že použití zmrazené tkáně přináší lepší výsledky. Adheziva byla použita na mikroskopických sklíčcích, ale místo toho, aby pomohla přilepit buňky, je obtížné zachytit specifické tkáňové vzorky. Přítomnost vlhkosti má negativní vliv na získávání buněk na filmu, takže během techniky jsou preferovány dehydratované tkáňové řezy.
Navzdory svým výhodám má mikrodisekce laserového záchytu několik nevýhod. Náklady na mikroskopy, počítače a software mohou být vysoké. Ukázky mohou být také obtížné, protože se nepoužívá krycí sklíčko mikroskopu, což je problém s mnoha podobnými technikami. Vědci také zjistili, že potřebují více času na provedení procesu, ale čistota vzorků získaných pomocí LCM stále převažuje nad výhodami jiných metod.