Co to jest żel poliakryloamidowy?

żel poliakryloamidowy jest roztworem powszechnie stosowanym w elektroforezy, proces oddzielenia cząsteczek lub cząsteczek o różnych rozmiarach poprzez przechodzenie przez żel i stosowanie prądu elektrycznego. Istnieją różne przepisy na żel poliakryloamidowy, ale zazwyczaj zawiera on akryloamid, wodę, bufor, persulfate amonu (APS) i tetrametyloetylenodiaminę (TEMED). Ten żel działa jako matryca, która oddziela związki na podstawie ich ładunku i wielkości; Im więcej akryloamidu w roztworze żelowym, lepsze oddzielenie mniejszych cząsteczek. Zazwyczaj żel ten jest używany do separacji białka i DNA.

W elektroforezie pole elektryczne powoduje, że naładowane cząsteczki poruszają się przez żel, który działa jak sito, powodując oddzielenie cząstek o różnych rozmiarach. Żel wchłonie wszelkie ciepło wytwarzane z prądu elektrycznego. Żel poliakryloamidowy jest powszechnie stosowany w tej procedurze, ale agaroza, inna chemikalia, która tworzy podobny żel, można również zastosować.

żele Ca CaN jest wykonane o różnym stężeniu, przy czym ilość akryloamidu wynosiła od około 6% do 15%. Podczas mieszania żelu akryloamid jest nieupolimeryzowany, co oznacza, że ​​pozostaje jako pojedyncze cząsteczki. Dodanie innych chemikaliów, które promują wiązanie, takie jak Temed, powoduje łączenie cząsteczek, tworząc długie łańcuchy - „poli” części poliakryloamidu.

Główną zaletą żelu poliakryloamidowego jest to, że liczba wiązań powiązań i twardości można kontrolować w oparciu o początkową ilość akryloamidu i dodanego TEMED. Głównym czynnikiem stężenia akryloamidu jest wielkość analizowanej cząsteczki. Im mniejsze są oddzielone związki, tym więcej akryloamidu jest potrzebny; Bardzo małe cząstki są oddzielone przy użyciu najwyższego stężenia, 15 procent.

akryloamid działa poprzez kontrolowanie tarcie w żelu; Twardość żelu określa ilość frykcjijon. Związki, które są duże, będą się powoli poruszać przez żel, ponieważ z powodu ich rozmiaru jest naturalnie więcej tarcia lub oporu. Mniejsze związki poruszają się szybciej, ponieważ jest mniej tarcia. Aby zapobiec odejściu małych związków z żelu, dodaje się więcej akryloamidu, aby stworzyć więcej tarcia.

żel poliakryloamidowy DNA służy do oddzielenia pasm DNA o różnej długości. Kawałki DNA będą oddzielone tak mało jak jeden nukleotyd, związki tworzące każdą nici. Aby wiedzieć, które elementy odnoszą się do określonych rozmiarów, powszechnie uruchamiany jest standard, który zawiera fragmenty znanego rozmiaru wraz z próbkami. Kawałki DNA są następnie porównywane ze standardem i określono wielkość nici.

Podobna procedura stosuje się do określenia wielkości białek, najczęściej tych we krwi. Krew zawiera dwa główne typy białka: globulina, białko o dużej wielkości i albuminę surowicy, bardzo małe, ujemnie naładowane białko. Separacja za pomocą żelu poliakryloamidowego to myed w celu określenia ilości każdego typu.