ポリアクリルアミドゲルとは何ですか?
ポリアクリルアミドゲルは、電気泳動で一般的に使用される溶液であり、ゲルを通過して電流を適用することにより、異なるサイズの分子または粒子を分離するプロセスです。ポリアクリルアミドゲルにはさまざまなレシピがありますが、通常、アクリルアミド、水、緩衝液、Persulfateアンモニウム(APS)、およびテトラメチレチレンジアミン(TEMED)が含まれています。このゲルは、電荷とサイズに基づいて化合物を分離するマトリックスとして機能します。ゲル溶液中のアクリルアミドが多いほど、より小さな分子のより良い分離。通常、このゲルはタンパク質とDNA分離に使用されます。
電気泳動では、電界は荷電粒子をゲルを通過させます。これは、ふるいのように機能して異なるサイズの粒子を分離させます。ゲルは、電流から生成された熱を吸収します。ポリアクリルアミドゲルはこれらの手順で一般的に使用されますが、同様のゲルを作成する別の化学物質であるアガロースも使用できます。
ゲルCAnさまざまな濃度で作られ、アクリルアミドの量は約6%から15%の範囲です。ゲルを混合するとき、アクリルアミドは重合していないため、単一分子のままであることを意味します。 Temedなどの結合を促進する他の化学物質の添加により、分子が結合して長い鎖を形成します。これは、ポリアクリルアミドの「ポリ」部分です。
ポリアクリルアミドゲルの主な利点は、結合結合と硬度の数を、アクリルアミドの初期量に基づいて制御できることです。アクリルアミド濃度の主な要因は、分析される分子のサイズです。化合物が分離されているほど、アクリルアミドが必要です。非常に小さな粒子は、最高濃度、15%を使用して分離されています。
アクリルアミドは、ゲルの摩擦量を制御することにより機能します。ゲルの硬度は摩擦の量を決定しますイオン。大きい化合物は、サイズのために自然に摩擦や抵抗性が高いため、ゲルをよりゆっくりと移動します。摩擦が少ないため、小さな化合物はより速く移動します。 小さな化合物がゲルから移動するのを防ぐために、より多くのアクリルアミドが追加されて摩擦が増えます。
DNAポリアクリルアミドゲルは、異なる長さのDNA鎖を分離するために使用されます。 DNAの断片は、各鎖を構成する化合物である1つのヌクレオチドによって分離されます。どのピースが特定のサイズを参照するかを知るために、既知のサイズのフラグメントを含む標準がサンプルとともに一般的に実行されます。次に、DNAピースが標準と比較され、ストランドのサイズが決定されます。
同様の手順は、タンパク質のサイズ、ほとんどの場合血液のサイズを決定するために使用されます。血液には、2つの主なタイプのタンパク質が含まれています。グロブリン、大きなサイズのタンパク質、および非常に小さく、負に帯電したタンパク質である血清アルブミンです。ポリアクリルアミドゲルを使用した分離は私たちです各タイプの量を決定するためにed。