¿Qué es un estándar interno?
Un estándar interno es una cantidad conocida de productos químicos agregados a una muestra analítica, que permite a los técnicos calibrar los instrumentos de laboratorio. Esto también permite el cálculo de cantidades de productos químicos desconocidos, porque el instrumento mostrará la cantidad del estándar conocido como referencia. Las pruebas que pueden beneficiarse de un estándar interno incluyen cromatografía de gas y líquido.
La cromatografía de gases pasa una muestra vaporizada a través de una columna empaquetada con una forma sólida y muy pura de suelo. La muestra se mueve a través de la columna con un gas inerte o no reactivo, como el nitrógeno o el argón. Diferentes moléculas absorben en la columna y luego se liberan en función de su estructura molecular. Luego, el gas lleva la muestra separada a una llama para crear iones o moléculas con pequeñas cargas eléctricas. Un detector determina la cantidad de cada ion y traza los resultados en un gráfico.
La cromatografía líquida también separa las muestras en diferentes moléculas, pero usa un solvente líquido paraMueva la muestra por gravedad o presión a través de un material estacionario. Un material de la cama de cromatografía puede ser una resina, tierra diatomeas o incluso otro líquido. La muestra se carga en la parte superior, y se agrega solvente para empujar la muestra hacia abajo a través del material de la columna.
Las partes de la muestra pasarán a través de la columna a diferentes tasas basadas en características moleculares o iónicas. Se toman pequeñas muestras de líquido, llamado alícuotas, a intervalos regulares desde la parte inferior de la columna. Estas muestras contendrán las diferentes moléculas que se han separado en la columna y se analizan para determinar su composición.
En ambos tipos de cromatografía, muchas variables pueden afectar los resultados. La velocidad de flujo del gas portador puede cambiar ligeramente, o las columnas pueden tener diferentes temperaturas para diferentes muestras. Agregar un estándar interno calibrado proporciona un resultado conocido para cualquier muestra colocada enel instrumento de prueba. Si alguna variable en el instrumento, como la tasa de flujo de gas, cambia por un pequeño porcentaje, el estándar cambiará en la misma cantidad.
Una vez que el instrumento se ha calibrado ejecutando una muestra con el estándar interno, se puede ejecutar una muestra química desconocida a través del mismo instrumento, con el estándar incluido. Los resultados mostrarán la composición química de lo desconocido, más el estándar interno, trazado en el gráfico creado por el instrumento. Conociendo la cantidad de estándar interno, se puede determinar la cantidad relativa de químicos desconocidos, lo que permitirá un cálculo de la concentración.
Es importante tener en cuenta que un estándar interno no se usa para reaccionar químicamente con cualquier muestra. Más bien, se utiliza para comparar moléculas de cualquier material desconocido con la cantidad conocida del estándar. Esta técnica se conoce como configuración de una variable, porque el estándar conocido siempre seguirá siendo el mismo de una muestra a otra, independientemente de otra condicións que puede cambiar.