Hvad er en intern standard?
En intern standard er en kendt mængde kemikalie, der tilføjes en analytisk prøve, som gør det muligt for teknikere at kalibrere laboratorieinstrumenter. Dette muliggør også beregning af mængder af ukendte kemikalier, fordi instrumentet viser mængden af den kendte standard som reference. Tests, der kan drage fordel af en intern standard, inkluderer gas og væskekromatografi.
Gaskromatografi fører en fordampet prøve gennem en søjle pakket med en fast, meget ren jordform. Prøven bevæges gennem søjlen med en inert eller ikke-reaktiv gas, såsom nitrogen eller argon. Forskellige molekyler absorberes på søjlen og frigøres derefter baseret på deres molekylstruktur. Gassen fører derefter den adskilte prøve til en flamme for at skabe ioner eller molekyler med små elektriske ladninger. En detektor bestemmer mængden af hver ion og viser resultaterne på et diagram.
Flydende kromatografi adskiller også prøver i forskellige molekyler, men bruger et flydende opløsningsmiddel til at flytte prøven ved hjælp af tyngdekraft eller tryk hen over et stationært materiale. Et kromatografibedmateriale kan være en harpiks, diatoméjord eller endda en anden væske. Prøven fyldes øverst, og opløsningsmiddel tilsættes for at skubbe prøven ned gennem søjlematerialet.
Dele af prøven vil passere gennem søjlen i forskellige hastigheder baseret på molekylære eller ioniske egenskaber. Små væskeprøver, kaldet alikvoter, udtages med regelmæssige intervaller fra bunden af søjlen. Disse prøver vil indeholde de forskellige molekyler, der er adskilt i søjlen, og analyseres for at bestemme deres sammensætning.
I begge typer kromatografi kan mange variabler påvirke resultaterne. Strømningshastigheden for bærergassen kan ændre sig lidt, eller søjler kan være ved forskellige temperaturer for forskellige prøver. Tilføjelse af en kalibreret intern standard giver et kendt resultat for enhver prøve placeret i testinstrumentet. Hvis nogle variabler i instrumentet, såsom gasstrømningshastighed, ændres med en lille procentdel, ændres standarden med den samme mængde.
Når instrumentet er blevet kalibreret ved at køre en prøve med den interne standard, kan en ukendt kemisk prøve køres gennem det samme instrument med den inkluderede standard. Resultaterne viser den kemiske sammensætning af det ukendte plus den interne standard, der er afbildet på grafen oprettet af instrumentet. Når man kender mængden af intern standard, kan den relative mængde ukendt kemikalie bestemmes, hvilket tillader en beregning af koncentrationen.
Det er vigtigt at bemærke, at en intern standard ikke bruges til kemisk reaktion med nogen prøve. Det bruges snarere til at sammenligne molekyler af ethvert ukendt materiale med den kendte mængde af standarden. Denne teknik kaldes indstilling af en variabel, fordi den kendte standard altid forbliver den samme fra prøve til prøve, uanset andre forhold, der kan ændre sig.