O que é um padrão interno?

Um padrão interno é uma quantidade conhecida de produto químico adicionado a uma amostra analítica, que permite aos técnicos calibrar instrumentos de laboratório. Isso também permite o cálculo de quantidades de produtos químicos desconhecidos, porque o instrumento mostrará a quantidade do padrão conhecido como referência. Os testes que podem se beneficiar de um padrão interno incluem cromatografia em fase gasosa e líquida.

A cromatografia gasosa passa uma amostra vaporizada através de uma coluna cheia de uma forma sólida e muito pura do solo. A amostra é movida através da coluna com um gás inerte ou não reativo, como nitrogênio ou argônio. Diferentes moléculas absorvem a coluna e são liberadas com base em sua estrutura molecular. O gás então carrega a amostra separada para uma chama para criar íons ou moléculas com pequenas cargas elétricas. Um detector determina a quantidade de cada íon e plota os resultados em um gráfico.

A cromatografia líquida também separa as amostras em diferentes moléculas, mas usa um solvente líquido para mover a amostra por gravidade ou pressão através de um material estacionário. Um material de leito de cromatografia pode ser uma resina, terra de diatomáceas ou mesmo outro líquido. A amostra é carregada na parte superior e o solvente é adicionado para empurrar a amostra para baixo através do material da coluna.

Partes da amostra passarão pela coluna em taxas diferentes, com base nas características moleculares ou iônicas. Pequenas amostras de líquido, chamadas alíquotas, são coletadas em intervalos regulares na parte inferior da coluna. Essas amostras conterão as diferentes moléculas que se separaram na coluna e serão analisadas para determinar sua composição.

Nos dois tipos de cromatografia, muitas variáveis ​​podem afetar os resultados. A taxa de fluxo do gás de arraste pode mudar um pouco ou as colunas podem estar em temperaturas diferentes para amostras diferentes. A adição de um padrão interno calibrado fornece um resultado conhecido para qualquer amostra colocada no instrumento de teste. Se alguma variável do instrumento, como a taxa de fluxo de gás, mudar em uma pequena porcentagem, o padrão mudará na mesma quantidade.

Uma vez que o instrumento foi calibrado executando uma amostra com o padrão interno, uma amostra química desconhecida pode ser executada através do mesmo instrumento, com o padrão incluído. Os resultados mostrarão a composição química do desconhecido, além do padrão interno, plotado no gráfico criado pelo instrumento. Conhecendo a quantidade de padrão interno, pode ser determinada a quantidade relativa de produto químico desconhecido, o que permitirá um cálculo da concentração.

É importante observar que um padrão interno não é usado para reagir quimicamente com nenhuma amostra. Em vez disso, é usado para comparar moléculas de qualquer material desconhecido com a quantidade conhecida do padrão. Essa técnica é conhecida como configuração de uma variável, porque o padrão conhecido sempre permanecerá o mesmo de amostra para amostra, independentemente de outras condições que possam mudar.