O que é um padrão interno?

Um padrão interno é uma quantidade conhecida de produto químico adicionado a uma amostra analítica, que permite aos técnicos calibrar os instrumentos de laboratório. Isso também permite o cálculo de quantidades de produtos químicos desconhecidos, porque o instrumento mostrará a quantidade do padrão conhecido como referência. Os testes que podem se beneficiar de um padrão interno incluem cromatografia em gás e líquido.

A cromatografia gasosa passa uma amostra vaporizada através de uma coluna embalada com uma forma sólida e muito pura de solo. A amostra é movida através da coluna com um gás inerte ou não reativo, como nitrogênio ou argônio. Diferentes moléculas absorvem a coluna e depois são liberadas com base em sua estrutura molecular. O gás transporta a amostra separada para uma chama para criar íons ou moléculas com pequenas cargas elétricas. Um detector determina a quantidade de cada íon e plota os resultados em um gráfico.

A cromatografia líquida também separa amostras em diferentes moléculas, mas usa um solvente líquido paraMova a amostra por gravidade ou pressão através de um material estacionário. Um material de leito de cromatografia pode ser uma resina, terra de diatomáceas ou mesmo outro líquido. A amostra é carregada na parte superior e o solvente é adicionado para empurrar a amostra para baixo pelo material da coluna.

Partes da amostra passarão pela coluna em taxas diferentes com base em características moleculares ou iônicas. Pequenas amostras de líquido, chamadas alíquotas, são coletadas em intervalos regulares da parte inferior da coluna. Essas amostras conterão as diferentes moléculas que se separaram na coluna e são analisadas para determinar sua composição.

Nos dois tipos de cromatografia, muitas variáveis ​​podem afetar os resultados. A taxa de fluxo do gás transportador pode mudar ligeiramente, ou as colunas podem estar em temperaturas diferentes para diferentes amostras. Adicionar um padrão interno calibrado fornece um resultado conhecido para qualquer amostra colocada emo instrumento de teste. Se alguma variável no instrumento, como a taxa de fluxo de gás, muda em uma pequena porcentagem, o padrão mudará na mesma quantidade.

Depois que o instrumento for calibrado executando uma amostra com o padrão interno, uma amostra química desconhecida pode ser executada pelo mesmo instrumento, com o padrão incluído. Os resultados mostrarão a composição química do desconhecido, além do padrão interno, plotado no gráfico criado pelo instrumento. Conhecendo a quantidade de padrão interno, a quantidade relativa de produtos químicos desconhecidos pode ser determinada, o que permitirá um cálculo da concentração.

É importante observar que um padrão interno não é usado para reagir quimicamente com qualquer amostra. Em vez disso, é usado para comparar moléculas de qualquer material desconhecido com a quantidade conhecida do padrão. Essa técnica é conhecida como definir uma variável, porque o padrão conhecido sempre permanecerá o mesmo da amostra para a amostra, independentemente de outra condiçãos isso pode mudar.