Wat is differentiële kleuring?
Hoewel microben of dierlijke cellen zichtbaar kunnen zijn onder de microscoop, kunnen de afzonderlijke delen van de kleine cel moeilijk te onderscheiden zijn, omdat de kleuren onder de microscoop op elkaar lijken of de cel doorzichtig lijkt. Laboratoriumanalisten die gespecialiseerd zijn in microscopische analyse van cellen gebruiken kleuringsmethoden om kleuren aan de cel te geven, zodat ze de delen duidelijk kunnen zien. Differentiële kleuring verwijst naar het type kleuring waarmee de analist verschillende typen cellen uit elkaar kan houden; het is een algemene term die verschillende kleuringsprocedures omvat.
Wanneer een dier in zijn cellen wordt afgebroken, kunnen de cellen qua uiterlijk en functie variëren. Gewoonlijk hebben verschillende soorten sets cellen die individueel onder de microscoop lijken. Een veel voorkomend voorbeeld van het verschil tussen soorten en groepen is de manier waarop de meeste bacteriën in twee groepen kunnen worden gesplitst op basis van hun reactie op een bepaald soort vlek dat de Gram-vlek wordt genoemd. Hans Christian Gram was een Deense microbioloog die de vlek voor het eerst uitvond in 1844, die nog steeds algemeen wordt gebruikt als een nuttige eerste stap van bacteriële identificatie in een laboratoriumomgeving.
Bij differentiële kleuring wordt een monster van een bacteriepopulatie behandeld met sets kleurstoffen in een proces dat stappen omvat zoals het verwarmen en wassen van de monsters, zodat de kleurstof in alle cellen komt. De verschillende stappen gebruiken kleurstoffen zoals kristalviolet en fuchsin, samen met andere stoffen zoals alcohol en jodium om de kleur te helpen fixeren. Cellen die roze lijken, worden geïdentificeerd als gramnegatief, terwijl blauwgekleurde cellen aan het einde van het proces grampositief zijn. Dit kleurverschil helpt de microbioloog om te bepalen welk type celwand de soort heeft, wat helpt om de mogelijke lijst met soorten te beperken waartoe een onbekend monster behoort. Naast het aangeven van het Gram-type, maakt het differentiële kleurproces de vormen en opstellingen van de cellen duidelijker, wat ook helpt bij de identificatie.
Dierlijke cellen kunnen ook worden gesorteerd onder de microscoop met differentiële kleuring. Cellen die in het bloed circuleren, reageren bijvoorbeeld anders op bepaalde vlekken. Een voorbeeld is de vlek van Wright, die kleurstoffen zoals eosine en methyleenblauw bevat en die een laboratoriumanalist kan vertellen welke soorten bloedcellen in een monster aanwezig zijn en in welke concentratie. Een eosinofiele cel heeft bijvoorbeeld de neiging om veel eosinekleuring op te nemen in vergelijking met andere bloedcellen. Analisten gebruiken over het algemeen vlekkleuring geïdentificeerd door differentiële kleuring samen met andere celeigenschappen zoals grootte, vorm en interne structuren om erachter te komen welke cellen in een monster zijn.