Co je diferenciální barvení?

Přestože pod mikroskopem mohou být viditelné mikroby nebo živočišné buňky, jednotlivé části malé buňky mohou být obtížně rozlišitelné, protože barvy pod mikroskopem se mohou jevit stejně, nebo se buňka jeví jako průhledná. Laboratorní analytici, kteří se specializují na mikroskopickou analýzu buněk, používají barvicí metody k propůjčení barvy buňce, aby mohli jasně vidět části. Diferenciální barvení označuje typ barvení, který umožňuje analytikovi rozeznat různé typy buněk odděleně; je to obecný termín, který zahrnuje různé postupy barvení.

Když je zvíře rozděleno na jeho buňky, buňky se mohou lišit svým vzhledem a funkcí. Obvykle různé druhy mají sady buněk, které se zdají být pod mikroskopem individuální. Běžným příkladem rozdílu mezi druhy a skupinami je způsob, jak lze většinu bakterií rozdělit do dvou skupin na základě jejich reakce na určitý druh skvrny nazývané Gramovo skvrny. Hans Christian Gram byl dánský mikrobiolog, který poprvé vynalezl skvrnu v roce 1844, která se stále běžně používá jako užitečný první krok bakteriální identifikace v laboratorním prostředí.

Při diferenciálním barvení je vzorek bakteriální populace ošetřen sadou barviv v procesu, který zahrnuje kroky, jako je zahřívání a promývání vzorků, takže se barvivo dostane do všech buněk. Různé kroky používají barviva, jako je křišťálová violeť a fuchsin, spolu s dalšími látkami, jako je alkohol a jód, které pomáhají fixovat barvu. Buňky, které vypadají růžově, jsou identifikovány jako gramnegativní, zatímco modré buňky na konci procesu jsou grampozitivní. Tento rozdíl barev pomáhá mikrobiologovi přesně určit, jaký typ buněčné stěny má daný druh, což pomáhá zúžit možný seznam druhů, do nichž neznámý vzorek patří. Proces diferenčního barvení kromě indikace typu Gram také zviditelňuje tvary a uspořádání buněk, což také pomáhá při identifikaci.

Živočišné buňky lze také třídit pod mikroskopem s diferenciálním barvením. Například buňky, které cirkulují v krvi, reagují odlišně na určité skvrny. Příkladem je Wrightovo barvení, které obsahuje barviva, jako je eosin a methylenová modrá, a které může laboratornímu analytikovi sdělit, jaké typy krvinek jsou přítomny ve vzorku a v jaké koncentraci. Například eozinofilní buňka má tendenci zabírat hodně eozinového zbarvení ve srovnání s jinými krevními buňkami. Analytici obecně používají zbarvení zbarvení identifikované diferenciálním barvením spolu s dalšími charakteristikami buněk, jako je velikost, tvar a vnitřní struktury, aby zjistili, které buňky jsou ve vzorku.