Qu'est-ce que la coloration différentielle?

Bien que des microbes ou des cellules animales puissent être visibles au microscope, il peut être difficile de différencier les différentes parties de la minuscule cellule, car les couleurs sous le microscope peuvent apparaître de la même manière, ou la cellule semble transparente. Les analystes de laboratoire spécialisés dans l'analyse microscopique de cellules utilisent des méthodes de coloration pour appliquer des couleurs à la cellule, afin qu'ils puissent voir les parties clairement. La coloration différentielle fait référence au type de coloration qui permet à l'analyste de distinguer différents types de cellules; c'est un terme général qui englobe une variété de procédures de coloration.

Lorsqu'un animal est décomposé en ses cellules, leur apparence et leur fonction peuvent varier. Généralement différentes espèces ont des ensembles de cellules qui apparaissent individuelles au microscope. Un exemple courant de différence entre les espèces et les groupes est la façon dont la plupart des bactéries peuvent être divisées en deux groupes en fonction de leur réaction à un type particulier de coloration appelé coloration de Gram. Hans Christian Gram était un microbiologiste danois qui avait inventé la tache en 1844, qui est encore couramment utilisé comme première étape utile de l'identification bactérienne en laboratoire.

Dans la coloration différentielle, un échantillon d'une population bactérienne est traité avec des ensembles de colorants selon un processus impliquant des étapes telles que le chauffage et le lavage des échantillons, de sorte que le colorant pénètre dans toutes les cellules. Les différentes étapes utilisent des colorants comme le cristal violet et la fuchsine, ainsi que d'autres substances comme l'alcool et l'iode pour aider à fixer la couleur. Les cellules qui apparaissent en rose sont identifiées comme étant à Gram négatif, alors que les cellules de couleur bleue à la fin du processus sont à Gram positif. Cette différence de couleur aide le microbiologiste à identifier le type de paroi cellulaire de l'espèce, ce qui permet de réduire la liste d'espèces pouvant appartenir à un échantillon inconnu. En plus d'indiquer le type de Gram, le processus de coloration différentielle rend les formes et les arrangements des cellules plus évidents, ce qui facilite également l'identification.

Les cellules animales peuvent également être triées au microscope avec coloration différentielle. Par exemple, les cellules qui circulent dans le sang réagissent différemment à certaines taches. Un exemple est le colorant de Wright, qui incorpore des colorants comme l'éosine et le bleu de méthylène, et qui peut indiquer à un analyste de laboratoire quels types de cellules sanguines sont présentes dans un échantillon et à quelle concentration. Par exemple, une cellule éosinophile a tendance à prendre beaucoup de coloration de l'éosine par rapport à d'autres cellules sanguines. Les analystes utilisent généralement la coloration de taches identifiée par la coloration différentielle ainsi que d’autres caractéristiques cellulaires telles que la taille, la forme et les structures internes pour déterminer les cellules d’un échantillon.