Wat is celcyclusanalyse?
Analyse van celcyclus is een techniek die wordt gebruikt in biochemisch onderzoek om de fase van een biologische cel te identificeren en te analyseren. Tijdens zijn leven passeert een cel een reeks cyclische fasen die gezamenlijk bekend staan als de celcyclus. De hoeveelheid deoxyribonucleïnezuur (DNA) in de celveranderingen op basis van de fase. In celcyclusanalyse wordt het DNA van de cel gekleurd met een fluorescerende kleurstof, waardoor onderzoekers kunnen bepalen hoeveel van het DNA aanwezig is en waar de cel zich in zijn cyclus bevindt.
De celcyclus bestaat uit twee brede fasen: interfase en mitose. Interfase bestaat uit voorbereiding op de verdeling van de cel of mitose, die ook de M -fase wordt genoemd. Het grootste deel van de levenscyclus van de cel wordt besteed aan het voorbereiden van mitose, wat in vergelijking kort is, dus interfase wordt onderverdeeld in drie delen: G1 -fase, S -fase en G2 -fase.
In G1 houdt de cel zich voornamelijk bezig met groei. Tijdens de S -fase is de genetische informatie van de cel in de vorm van DNA REGeplaatste ter voorbereiding op zijn verdeling in twee dochtercellen. In G2 bereidt de cel zich voor op deling, die leidt naar de M -fase. Na mitose keert de cel terug naar het G1 -gedeelte van de interfase en begint de cyclus opnieuw. Cellen die om een of andere reden stoppen met delen, verlaten de cyclus en bestaan inerty in wat bekend staat als de G0 -fase.
De cel repliceert zijn DNA tijdens de S -fase, dus er is twee keer zoveel DNA in de cel tijdens G2 en M dan in G1 of G0. Onderzoekers gebruiken deze informatie in celcyclusanalyse om de celfase te bepalen. Celcyclusanalyse kan ook afwijkingen onthullen in cellulair DNA.
De techniek die wordt gebruikt in celcyclusanalyse staat bekend als flowcytometrie. Eerst wordt een fluorescerende kleurstof in de cel geïntroduceerd die de DNA -moleculen bevlekt door chemisch aan hen te binden. Onderzoekers gebruiken vervolgens een instrument dat een cytometer wordt genoemd om de intensiteit van deCell's fluorescentie. Een hogere fluorescentie geeft aan dat meer kleurstof kon binden, en het laat zien dat er meer DNA in de cel zit.
Gewoonlijk wordt celcyclusanalyse gebruikt op een groep cellen. Een type grafiek die een histogram wordt genoemd, wordt gegenereerd uit de gegevens, die vaak twee verschillende pieken vertoont: een die de populatie cellen in de G1 -fase toont, en een andere - twee keer zo hoog - die die in de G2 -fase toont. De G2 -fasepiek is twee keer zo hoog omdat de cellen in die populatie tweemaal de hoeveelheid DNA bevatten als die in de G1 -piek. Cellen die zich in de S -fase bevinden, die nog steeds bezig zijn met het repliceren van DNA, verschijnen op de grafiek op een tussenliggend niveau tussen de twee pieken.