O que é análise do ciclo celular?
A análise do ciclo celular é uma técnica usada na pesquisa bioquímica para identificar e analisar a fase de uma célula biológica. Durante sua vida útil, uma célula passa por uma série de fases cíclicas que, coletivamente, são conhecidas como ciclo celular. A quantidade de ácido desoxirribonucleico (DNA) na célula muda com base na fase. Na análise do ciclo celular, o DNA da célula é corado com um corante fluorescente, permitindo que os pesquisadores determinem quanto do DNA está presente e onde a célula está em seu ciclo.
O ciclo celular consiste em duas grandes fases: interfase e mitose. A interfase consiste na preparação para a divisão da célula, ou mitose, que também é chamada de fase M. A maior parte do ciclo de vida da célula é gasta preparando-se para a mitose, que é breve em comparação, portanto, a interfase é subdividida em três partes: fase G1, fase S e fase G2.
No G1, a célula está preocupada principalmente com o crescimento. Durante a fase S, a informação genética da célula na forma de DNA é replicada em preparação para sua divisão em duas células filhas. No G2, a célula se prepara para a divisão, levando à fase M. Após a mitose, a célula retorna à seção G1 da interfase e o ciclo começa novamente. As células que, por algum motivo, param de se dividir, deixam o ciclo e existem inerentemente no que é conhecido como fase G0.
A célula replica seu DNA durante a fase S, portanto, há duas vezes mais DNA na célula durante G2 e M do que em G1 ou G0. Os pesquisadores usam essas informações na análise do ciclo celular para determinar a fase celular. A análise do ciclo celular também pode revelar anormalidades no DNA celular.
A técnica usada na análise do ciclo celular é conhecida como citometria de fluxo. Primeiro, um corante fluorescente é introduzido na célula que mancha as moléculas de DNA por ligação química a elas. Os pesquisadores então usam um instrumento chamado citômetro para determinar a intensidade da fluorescência da célula. Uma fluorescência mais alta indica que mais corante foi capaz de se ligar e mostra que há mais DNA na célula.
Normalmente, a análise do ciclo celular é usada em um agrupamento de células. Um tipo de gráfico chamado histograma é gerado a partir dos dados, geralmente mostrando dois picos distintos: um que mostra a população de células na fase G1 e outro - duas vezes maior - mostrando aqueles na fase G2. O pico da fase G2 é duas vezes maior porque as células nessa população contêm duas vezes a quantidade de DNA que as do pico G1. As células que estão na fase S, que ainda estão em processo de replicação do DNA, aparecem no gráfico em um nível intermediário entre os dois picos.