Co je analýza buněčného cyklu?
Analýza buněčného cyklu je technika, která se používá v biochemickém výzkumu k identifikaci a analýze fáze biologické buňky. Během svého života prochází buňka řadou cyklických fází, které jsou kolektivně známé jako buněčný cyklus. Množství kyseliny deoxyribonukleové (DNA) v buňce se mění na základě fáze. Při analýze buněčného cyklu je DNA buněk obarvena fluorescenčním barvivem, což vědcům umožňuje určit, kolik DNA je přítomno a kde je buňka ve svém cyklu. Interfáze sestává z přípravy na dělení buňky nebo mitózy, která se také nazývá M fáze. Většina životního cyklu buňky se věnuje přípravě na mitózu, což je ve srovnání krátká, takže mezifáze je rozdělena do tří částí: fáze G1, fáze S a fáze G2.
V G1 se buňka týká hlavně růstu. Během fáze S je genetická informace buňky ve formě DNA REnakláněno na přípravě na jeho rozdělení do dvou dceřiných buněk. V G2 se buňka připravuje na dělení, což vede do fáze M. Po mitóze se buňka vrací do části G1 mezifáze a cyklus začíná znovu. Buňky, které z nějakého důvodu přestanou dělit, opouštějí cyklus a existují inertně v tzv. Fázi G0.
buňka replikuje svou DNA během fáze S, takže v buňce je během G2 a M dvakrát tolik DNA než v G1 nebo G0. Vědci používají tyto informace v analýze buněčného cyklu k určení buněčné fáze. Analýza buněčného cyklu může také odhalit abnormality v buněčné DNA.
Technika použitá při analýze buněčného cyklu je známá jako průtoková cytometrie. Nejprve je do buňky zavedeno fluorescenční barvivo, které skvrkuje molekuly DNA chemicky vazbou na ně. Vědci poté použijí nástroj zvaný cytometr k určení intenzityFluorescence buněk. Vyšší fluorescence ukazuje, že více barviva se mohlo vázat a ukazuje, že v buňce je více DNA.
Obvykle se analýza buněčného cyklu používá na seskupení buněk. Z dat je generován typ grafu zvaného histogram, často ukazující dva odlišné píky: jeden, který ukazuje populaci buněk ve fázi G1 a další - dvakrát tak vysoko - ukazující ty ve fázi G2. Pík fáze G2 je dvakrát vysoký, protože buňky v této populaci obsahují dvojnásobek množství DNA jako buňky na vrcholu G1. Buňky, které jsou ve fázi S, které jsou stále v procesu replikace DNA, se zobrazují na grafu na střední úrovni mezi dvěma vrcholy.