Hvad er cellecyklusanalyse?
Cellecyklusanalyse er en teknik, der bruges i biokemisk forskning til at identificere og analysere fasen af en biologisk celle. I løbet af sin levetid passerer en celle gennem en række cykliske faser, der kollektivt er kendt som cellecyklussen. Mængden af deoxyribonukleinsyre (DNA) i celleændringerne baseret på fasen. I cellecyklusanalyse er cellens DNA farvet med et fluorescerende farvestof, hvilket giver forskere mulighed for at bestemme, hvor meget af DNA'et der er til stede, og hvor cellen er i sin cyklus.
Cellecyklussen består af to brede faser: interfase og mitose. Interfase består af forberedelse til opdelingen af cellen eller mitose, der også kaldes M -fasen. Det meste af cellens livscyklus bruges til at forberede sig til mitose, som er kort til sammenligning, så interfase er opdelt i tre dele: G1 -fase, S -fase og G2 -fase.
I G1 er cellen hovedsageligt optaget af vækst. I S -fasen er cellens genetiske oplysninger i form af DNAPlettet som forberedelse til sin opdeling i to datterceller. I G2 forbereder cellen sig til opdeling og fører ind i M -fasen. Efter mitose vender cellen tilbage til G1 -sektionen af interfase, og cyklussen begynder igen. Celler, der af en eller anden grund holder op med at opdele, skal du forlade cyklussen og eksisterer inttly i det, der er kendt som G0 -fasen.
Cellen replikerer sit DNA i S -fasen, så der er dobbelt så meget DNA i cellen under G2 og M, end der er i G1 eller G0. Forskere bruger disse oplysninger i cellecyklusanalyse til at bestemme cellefasen. Cellecyklusanalyse kan også afsløre abnormiteter i cellulært DNA.
Teknikken anvendt i cellecyklusanalyse er kendt som flowcytometri. Først indføres et fluorescerende farvestof i cellen, der pletter DNA -molekylerne ved kemisk bindende for dem. Forskere bruger derefter et instrument kaldet et cytometer til at bestemme intensiteten afCells fluorescens. En højere fluorescens indikerer, at mere farvestof var i stand til at binde, og det viser, at der er mere DNA i cellen.
Normalt bruges cellecyklusanalyse på en gruppering af celler. En type diagram kaldet et histogram genereres fra dataene, der ofte viser to forskellige toppe: en, der viser population af celler i G1 -fasen, og en anden - dobbelt så høj - der viser dem i G2 -fasen. G2 -fasetoppen er dobbelt så høj, fordi cellerne i denne population indeholder dobbelt så stor DNA som dem i G1 -toppen. Celler, der er i S -fasen, som stadig er i færd med at replikere DNA, dukker op på grafen på et mellemniveau mellem de to toppe.