Hva er cellesyklusanalyse?

Cellesyklusanalyse er en teknikk som brukes i biokjemisk forskning for å identifisere og analysere fasen av en biologisk celle. I løpet av levetiden passerer en celle gjennom en serie sykliske faser som samlet er kjent som cellesyklusen. Mengden deoksyribonukleinsyre (DNA) i celleendringene basert på fasen. I cellesyklusanalyse er cellens DNA farget med et lysstofffarge, slik at forskere kan bestemme hvor mye av DNAet som er til stede og hvor cellen er i syklusen.

Cellesyklusen består av to brede faser: interfase og mitose. Interfase består av preparat for inndelingen av cellen, eller mitose, som også kalles M -fasen. Det meste av cellens livssyklus brukes til å forberede seg på mitose, noe som er kort til sammenligning, så interfase er delt inn i tre deler: G1 -fase, S -fase og G2 -fase.

I G1 er cellen hovedsakelig opptatt av vekst. I løpet av S -fasen er cellens genetiske informasjon i form av DNA REPlikat som forberedelse til sin inndeling i to datterceller. I G2 forbereder cellen seg til divisjon, og fører inn i M -fasen. Etter mitose vender cellen tilbake til G1 -delen av interfase, og syklusen begynner igjen. Celler som av en eller annen grunn slutter å dele opp syklusen og eksisterer inert i det som er kjent som G0 -fasen.

Cellen replikerer DNA -DNAet i S -fasen, så det er dobbelt så mye DNA i cellen under G2 og M enn det er i G1 eller G0. Forskere bruker denne informasjonen i cellesyklusanalyse for å bestemme cellefasen. Cellesyklusanalyse kan også avsløre avvik i cellulært DNA.

Teknikken som brukes i cellesyklusanalyse er kjent som flowcytometri. Først introduseres et fluorescerende fargestoff i cellen som flekker DNA -molekylene ved kjemisk binding til dem. Forskere bruker deretter et instrument som kalles et cytometer for å bestemme intensiteten tilCellens fluorescens. En høyere fluorescens indikerer at mer fargestoff var i stand til å binde seg, og det viser at det er mer DNA i cellen.

Vanligvis brukes cellesyklusanalyse på en gruppering av celler. En type diagram kalt et histogram genereres fra dataene, og viser ofte to distinkte topper: en som viser populasjonen av celler i G1 -fasen, og en annen - dobbelt så høy - som viser de i G2 -fasen. G2 -fasetoppen er dobbelt så høy fordi cellene i den populasjonen inneholder dobbelt så mye DNA som de i G1 -toppen. Celler som er i S -fasen, som fremdeles er i ferd med å replisere DNA, dukker opp på grafen på mellomnivå mellom de to toppene.