Co to jest polimorfizm długości fragmentu ograniczenia?
Polimorfizm długości fragmentu ograniczenia lub RFLP jest zmianą homologicznych sekwencji DNA. Polimorfizmy są zmianami homologicznego DNA, które występują między jednostkami, podczas gdy termin ograniczenie odnosi się do faktu, że małe odcinki DNA można wyciąć z dużego kawałka przy użyciu enzymów ograniczników. Niektóre sekcje DNA mają większą zmienność niż inne, a sekcje o wysokim stopniu zmienności są przydatne w analizie polimorfizmu długości fragmentu ograniczenia.
Polimorfizm długości fragmentu fragmentu opiera się na aktywności endonukleaz ograniczników. Ta klasa enzymu występuje u wielu gatunków bakteryjnych. W bakterii rolą endonukleaz ograniczników jest zapewnienie ochrony przed obcym DNA, która zyskuje dostęp, poprzez rozbicie go na kawałki. W badaniach molekularnych enzymy restrykcyjne mogą być stosowane do fragmentu DNA w znanych miejscach zmienności, aby można było analizować powstałe fragmenty.
Każdy rodzaj enzymu rozpoznaje określoną podstawę DNA PAI PAIsekwencja R i działa w celu rozszczepienia cząsteczki DNA w dowolnym momencie, w którym rozpoznaje sekwencję. Bakterie chronią własne DNA przed złamaniem z charakterystycznym wzorem metylacji DNA, który zapobiega wiązaniu endonukleaz ograniczenia. Odkryto ponad 800 różnych endonukleaz ograniczenia, które razem rozpoznają ponad 100 unikalnych sekwencji nukleotydowych. Większość rozpoznanych sekwencji ma długość od czterech do sześciu par.
enzymy restrykcyjne są stosowane w biotechnologii do analizy polimorfizmu długości fragmentu ograniczenia z różnych powodów. Enzymy są używane do obniżania długości DNA w niektórych sekwencjach, aby można było zbadać różnice między jednostkami. Roztwory rozdrobnionego DNA, wycięte w niektórych znanych sekwencjach nukleotydowych, są hybrydyzowane z sondami zaprojektowanymi do wykrywania wstępnie zdefiniowanych sekwencji DNA. Próbki są następnie analizowane za pomocą elektroforezy żelowej.Ta technika wytwarza żel z wieloma pasmami ciemnego barwienia, z których każdy stanowi inny fragment DNA. Badając wzór barwienia, naukowcy mogą określić wzór RFLP obecny w próbce.
Polimorfizmy występują szeroko w całym ludzkim genomie, a ich analiza udowodniła, że różne grupy ludzi mają zwykle wspólne RFLP. Na przykład niektóre typy RFLP są wspólne dla osób różnych grup etnicznych lub pochodzenia geograficznego, a powiązanie istnieje również w grupach rodzinnych. Ta różnice istnieje w całym królestwie zwierząt, co czyni ją przydatnym narzędziem badawczym nie tylko do śledzenia ludzkiego pochodzenia, ale także do badania migracji i ewolucji dzikiej przyrody.
Analiza polimorfizmów długości fragmentu ograniczenia może dostarczyć przydatnych informacji do celów klinicznych i medycznych. Sondy polimorfizmu fragmentu fragmentu ograniczenia są stosowane w testach ojcostwa, w diagnozowaniu chorób dziedzicznych, w naukach kryminalistycznych i w genotypowaniu. AnaLyzing Wzory RFLPS w całym genomie są podstawą odcisków palców DNA, technika, która jest podstawą wszystkich tych różnych zastosowań.