O que está envolvido na medição dos níveis de enzimas?

Os testes de laboratório que medem os níveis e a atividade enzimática são conhecidos como ensaios enzimáticos. Existem muitos tipos de métodos de medição que medem a taxa de atividades enzimáticas e inibições enzimáticas. As enzimas são moléculas que manipulam outras moléculas, conhecidas como substratos, ligando-se a elas e reagindo quimicamente com elas para produzir vários subprodutos. Os testes que medem essa atividade têm finalidades diferentes, de acordo com sintomas específicos da doença, e consideram etapas diferentes nos processos enzimáticos.

Os ensaios que examinam a cinética enzimática mostram quanto mais ou menos da norma um comportamento enzimático realmente é. Existem fatores a serem controlados ao realizar ensaios enzimáticos, como as enzimas que funcionam de maneira específica de acordo com as temperaturas dentro de um organismo, e as enzimas não podem tolerar altos níveis de sal, pois o excesso de sal interfere na capacidade da enzima de se ligar a outras proteínas. Muitas enzimas podem operar apenas dentro de uma pequena faixa de pH; portanto, os valores de pH no corpo também precisam ser medidos. Um pH alto pode inibir completamente as atividades enzimáticas.

Existem dois tipos principais de ensaios enzimáticos: contínuo, em que são feitas leituras constantes e descontínuo, em que após um período de tempo uma reação química é perturbada e a quantidade de concentrações de substrato e subprodutos é medida. Em ensaios contínuos, para testar os níveis de um substrato chamado NADH, que afeta o metabolismo, ou o NADPH, que afeta a capacidade do corpo de reagir bem com terapias medicamentosas, é utilizado um ensaio espectrofotométrico, que aparece sob seu ultravioleta (UV) raios. Os chamados ensaios fluorométricos definem diferenças na fluorescência em alguns substratos enzimáticos. Os ensaios calorimétricos medem a quantidade de calor durante as reações químicas das enzimas e os ensaios quimioluminescentes medem a luz produzida durante as reações químicas e podem detectar anticorpos para doenças. Em ensaios descontínuos, os testes radiométricos podem medir a absorção ou liberação da radioatividade quando as proteínas e o substrato se ligam e os ensaios cromatográficos medem a formação de subprodutos das ligações enzima-substrato.

Alguns exames de sangue costumam ser realizados para testar níveis enzimáticos específicos para determinar danos no coração. Existe um certo número de várias proteínas que estarão presentes no sangue em grandes volumes quando um músculo cardíaco for danificado, por exemplo. Esses testes devem ser realizados com cuidado, pois a doença renal também pode levar a quase os mesmos níveis dessas mesmas enzimas. Outra condição conhecida como hipertensão maligna pode levar a níveis elevados de enzimas cardíacas; portanto, outros testes além dos ensaios enzimáticos serão necessários para determinar a causa provável dos altos níveis enzimáticos.