Co je DNA gelová elektroforéza?
DNA gelová elektroforéza je proces používaný k oddělení proteinů a nukleových kyselin v molekulární biologii. Gel je obvykle složen ze zesítěného polymeru a akrylamidu, které pomáhají oddělit a analyzovat různé části molekuly DNA. Elektroforéza na DNA gelu se běžně používá v forenzní metodě ke stanovení specifické sekvence DNA, která pomůže najít hlavního podezřelého. To je také běžně používané v genetice a oblasti molekulární biologie a biochemie.
Nukleové kyseliny a proteiny nesou buď pozitivní nebo negativní náboj. Když je umístěn do elektrické komory v elektroforéze na DNA gelu, každý elektrický náboj se bude pohybovat směrem k jednomu konci komory. Negativní elektrické nabité molekuly se budou pohybovat k pozitivnímu konci komory, zatímco pozitivní elektrické nabité molekuly se budou pohybovat k negativnímu konci. Gel odděluje každou z těchto molekul tak, aby se rovnoměrně šířily po celou dobu odečtu. Gel je složen z dlouhých vláken, která zabraňují molekulám v pohybu, což pomáhá při analýze jednotlivých molekul.
Southern blotting je technika používaná v elektroforéze na gelu DNA ke stanovení přítomnosti nebo nepřítomnosti specifické nukleotidové sekvence v molekule DNA. Northern blotting je jiná technika používaná k identifikaci genové exprese v přítomnosti RNA nebo ribonukleové kyseliny. Východní blotování se používá ke stanovení přítomnosti lipidů, proteinů a uhlohydrátů v sekvenci DNA. Pro jednoduchou detekci proteinů v sekvenci DNA se v elektroforetické komoře používá technika gelové izolace gelovou izolací.
Zymografie je také přístupem k detekci určitých biologických funkcí pomocí elektroforézy na DNA gelu. Používá se hlavně ke studiu enzymů degradujících extracelulární matrici, které katalyzují destrukci matrice mimo buňku, stejně jako bazální membránu buňky. Použití polyakrylamidového gelu pomáhá při separaci enzymů, což jsou proteiny, použitím proteinového substrátu, jako je želatina nebo kasein. Tato technika se používá k měření množství degradační aktivity vyskytující se mimo buňku.
Elektroforéza na DNA gelu se v forenzní praxi používá poměrně často. Používá se k oddělení krevních bílkovin a DNA nalezené na místě činu k určení korelace s dostupnými podezřelými. Gelová elektroforéza se také používá ke stanovení specifické dědičnosti v genetice, protože určité DNA a proteiny jsou spojovány s různými rasami. Používá se také k řešení případů otcovství k určení relativního vztahu mezi jednotlivci.