Qu'est-ce que l'électrophorèse sur gel d'ADN?
L'électrophorèse sur gel d'ADN est un processus utilisé pour séparer les protéines et les acides nucléiques en biologie moléculaire. Le gel est généralement composé d'un polymère réticulé et d'acrylamide, qui aident à séparer et à analyser différentes parties d'une molécule d'ADN. L'électrophorèse sur gel d'ADN est couramment utilisée en criminalistique pour déterminer la séquence spécifique de l'ADN permettant de retrouver le principal suspect. Il est également couramment utilisé en génétique et dans les domaines de la biologie moléculaire et de la biochimie.
Les acides nucléiques et les protéines portent une charge positive ou négative. Lorsqu'elle est placée dans une chambre électrique en électrophorèse sur gel d'ADN, chaque charge électrique se déplace vers l'une ou l'autre des extrémités de la chambre. Les molécules à charge électrique négative se déplaceront à l'extrémité positive de la chambre, tandis que les molécules à charge électrique positive se déplaceront à l'extrémité négative. Le gel sépare chacune de ces molécules afin qu'elles se répartissent uniformément tout au long de la lecture. Le gel est composé de longues fibres qui empêchent les molécules de se déplacer pour faciliter l'analyse des molécules individuelles.
Le transfert de Southern est une technique utilisée dans l'électrophorèse sur gel d'ADN pour déterminer la présence ou l'absence d'une séquence nucléotidique spécifique dans une molécule d'ADN. Northern blot est une technique différente utilisée pour identifier l'expression d'un gène en présence d'ARN ou d'acide ribonucléique. Eastern blotting est utilisé pour déterminer la présence de lipides, de protéines et de glucides dans une séquence d'ADN. Pour détecter simplement les protéines dans une séquence d'ADN, la technique de Western Blot est utilisée dans la chambre d'électrophorèse par isolement sur gel.
La zymographie est également une approche permettant de détecter certaines fonctions biologiques par électrophorèse sur gel d’ADN. Il est principalement utilisé pour étudier les enzymes extracellulaires dégradant la matrice, qui catalysent la destruction de la matrice à l'extérieur de la cellule, ainsi que de la membrane basale d'une cellule. L'utilisation de gel de Polyacrylamide facilite la séparation des enzymes, qui sont des protéines, en utilisant un substrat protéique tel que la gélatine ou la caséine. Cette technique est utilisée pour mesurer la quantité d'activité de dégradation se produisant en dehors de la cellule.
L'électrophorèse sur gel d'ADN est assez souvent utilisée en criminalistique. Il est utilisé pour séparer les protéines sanguines et l'ADN trouvés sur les lieux d'un crime afin de déterminer les corrélations avec les suspects disponibles. L'électrophorèse sur gel est également utilisée pour déterminer un héritage spécifique au sein de la génétique, car certains ADN et protéines sont associés à différentes races. Il est également utilisé pour résoudre des cas de paternité afin de déterminer la relation relative entre les individus.