Was sind Phospho-Antikörper?
Proteinphosphorylierung ist die Addition einer Phosphatgruppe (PO4) an ein spezifisches Protein, üblicherweise an einen Serin-, Threonin- oder Tyrosinrest. Im Allgemeinen ist die Proteinphosphorylierung einer der Hauptwege, auf denen die Signaltransduktion und die enzymatischen Aktivitäten in Zellen reguliert werden. Antikörper, die diese phosphorylierten Proteinstellen nachweisen, werden Phospho-Antikörper genannt. Die Fähigkeit, den phosphorylierten Rest eines Proteins an einer bestimmten Stelle nachzuweisen, ist ein wertvolles Instrument zum Nachweisen der Aktivität von Zellsignalwegen und ein Schlüssel zum Verständnis vieler zellulärer Signalprozesse.
Die Addition der Phosphatgruppe an einen Serin-, Threonin- oder Tyrosinrest kann zu einer Proteinaktivierung oder -inaktivierung führen, indem entweder eine Konformationsänderung im Protein induziert wird oder indem die Wechselwirkungen des Proteins mit anderen Proteinen oder Molekülen beeinflusst werden. Die Phosphorylierung spielt eine wichtige Rolle bei vielen wichtigen zellulären Signalprozessen, einschließlich Zellwachstum und -tod, Signalwegen, die die Tumorentstehung induzieren oder hemmen, hormonellen Signalprozessen und der Energieerzeugung. Proteine werden durch Enzyme, die als Kinasen bezeichnet werden, phosphoryliert und durch Enzyme, die als Phosphatasen bezeichnet werden, dephosphoryliert. Der Prozess der reversiblen Phosphorylierung ermöglicht es einer Zelle daher, diese wichtigen Signalwege genau zu steuern.
Antikörper sind Y-förmige Moleküle, die am Ende jedes Y-Arms Antigen-Bindungsstellen enthalten. Im Allgemeinen erkennen Antikörper eindeutige Sequenzen in ihren entsprechenden Antigenen, die als Epitope bezeichnet werden. Die Antikörperproduktion erfolgt auf natürliche Weise als Teil der Immunantwort, wenn ein Wirt einem Fremdkörper ausgesetzt ist, wodurch der Antikörper diese Fremdantigene spezifisch erkennen und neutralisieren kann. Dieser natürliche Prozess kann zu Forschungszwecken verwendet werden, indem Antikörper erzeugt werden, die spezifisch ein Antigen oder Protein von Interesse nachweisen. Bei der Erzeugung von Forschungsantikörpern handelt es sich bei der Wirtsspezies häufig um Kaninchen, Mäuse, Schafe oder Ziegen. Forscher können jedoch auch Immunzellen in Kultur verwenden, um Antikörper gegen das Antigen von Interesse zu erzeugen.
Phospho-Antikörper können entweder in der Forschung oder in klinischen Anwendungen eingesetzt werden. In klinischen Situationen kann der Nachweis eines bestimmten phosphorylierten Proteins durch einen Phospho-Antikörper in einer Tumorprobe dazu beitragen, den Tumorgrad zu bestimmen oder sogar den Krankheitsverlauf vorherzusagen. In der Forschung werden Phospho-Antikörper häufig verwendet, um die Aktivierung von Zellsignalwegen als Reaktion auf einen bestimmten Stimulus zu untersuchen.
Viele Hersteller von Antikörpern bieten Forschern und Klinikern Phospho-Antikörper an. Die Forscher können diese Antikörper aus einem Antikörperkatalog auswählen, der häufig Reagenzien für Hunderte verschiedener phosphorylierter Proteine enthält. Darüber hinaus bieten verschiedene Antikörperhersteller die Herstellung von kundenspezifischen Antikörpern für selten untersuchte phosphorylierte Proteine an, für die kein kommerzieller Phospho-Antikörper verfügbar ist.