ペプチド精製とは何ですか？

ペプチドは、アミノ酸で構成される小さなポリマーです。多くは、ホルモン、毒素、または他の能力を持っているように生物学的に活性です。このような化合物は、生物学的、医学的、化学的研究で頻繁に使用されます。また、タンパク質の数がリンクされている場合、タンパク質の構成要素としても機能します。ペプチド精製は、目的のペプチドを大量に精製するか、タンパク質の消化から生成されたペプチドを分離するのに役立つ技術です。

ペプチドの精製は、クロマトグラフィーの技術を使用して実現されます。高圧液体クロマトグラフィー（HPLC）は、一般的にペプチド精製に使用されます。ペプチドまたはペプチドは、高圧で小さなビーズの柱に汲み上げられると時間とともに変化する溶媒の混合物に塗布されます。さまざまなペプチドがさまざまな時点で溶出し、モニター、しばしばUV分光光度計によって検出されます。

ペプチドに関する研究を実施する場合、多くの場合、関心のある物質はまれであり、化学会社から購入することはできません。目的のペプチドの構造がわかっている場合、自然源から化合物を分離するよりも、ペプチド合成によって化学的に調製する方が頻繁に簡単です。天然物の分離は難しいことで有名です。合成ペプチドは一般にHPLCによって精製されます。

そのような化学合成は、化学者ではない独立した研究者にとって困難なかもしれません。多くの場合、このタスクは、これらの技術を専門とするペプチド合成会社と契約されています。これは、研究室でシステムをゼロからセットアップしようとするよりも経済的かもしれません。ペプチド企業は、研究者のニーズに合わせてカスタムペプチドを作ることができます。

ペプチド浄化のもう1つの理由は、研究者がタンパク質を精製し、そのIDENを決定しようとしている場合になる可能性があります。tity。彼または彼女は、タンパク質をペプチドフラグメントに分解し、精製によって断片を分離し、カラムから溶出するときに質量分析計によって検出されたペプチドの断片化パターンを持つことができます。この手法は、LC-MSとして知られており、液体クロマトグラフィマス分析の略です。断片の分子量とアミノ酸組成を与え、しばしば類似または同一のものが以前に特定されている場合、タンパク質の同定を可能にします。

多くの研究者は、不自然なアミノ酸などの新しい特徴を持つペプチドを使用して、異常な生物学的活性を持つものを見つけようとしています。そのような新規ペプチドの研究に充てられたペプチド模倣学と呼ばれる全体の分野があります。多くの場合、コンピューターで生成された配列が設計されており、さまざまな非定型ペプチドを含むペプチドライブラリーが合成されます。ペプチド精製は、このライブラリの個々のメンバーを分離して、生物学的活動をテストするために純粋なペプチドを提供するために使用されますvity。この戦略は、少なくとも1つの新しい市販の薬を生成することに成功しています。

生物学的に活性化するペプチドの多くは、医学的使用に興味があります。インスリンなどの商業的に使用される化合物は、一般に、目的の化合物の大量を生成する組換えDNA過剰発現システムによって生成されます。多くの場合、ペプチドは、何らかのタグを前面に追加することにより、精製を促進するために遺伝子組み換えされています。これにより、アフィニティクロマトグラフィーを使用してペプチドを精製できます。

このタイプのクロマトグラフィーでは、タグはヒスチジンなどの化合物であり、ニッケルのようなビーズのマトリックスに結合し、タグを結合する能力のために選択されます。不要なタンパク質とペプチドは一般に、結合せずにカラムを通過します。特異的に設計されたペプチドは、通常、カラムに強く結合します。汚染タンパク質とペプチドが洗い流された後、目的のペプチドは競合する化合物によって溶出されますマトリックスへのバインディング。その後、目的のペプチドのかなり純粋な調製があり、切断によってタグを除去できます。