Wat is een transfectiereagens?
Een transfectiereagens is een drager voor DNA die een onderzoeker kan gebruiken om het DNA in cellen in kweek in te voegen. Er zijn een aantal soorten reagentia beschikbaar via life sciences-bedrijven, en onderzoekers kunnen ook hun eigen reagentia ontwikkelen voor aangepaste toepassingen. Deze moleculen kunnen op een aantal verschillende manieren werken om DNA in de doelcellen te brengen en het in hun genoom in te voegen. Het typische proces omvat het mengen van het gewenste DNA met het reagens, het toevoegen aan cellen in kweek, het incuberen en vervolgens screenen om te zien welke het nieuwe DNA bevatten.
DNA-transfectie is een zeer belangrijk onderzoekstool. Onderzoekers kunnen genetisch materiaal invoegen om genen in te schakelen of tot zwijgen te brengen en kunnen transfectie gebruiken om cellen in kweek te dwingen op een bepaalde manier te presteren. Het doel kan tijdelijke genetische expressie zijn voor het doel van studie. Het kan ook een permanente modificatie zijn waarmee de onderzoeker een kolonie gekloonde cellen kan creëren die allemaal hetzelfde gen tot expressie brengen. Deze cellen kunnen worden gebruikt in onderzoek en kunnen therapeutische toepassingen hebben.
Calciumfosfaat is een van de oudste transfectiereagentia. Onderzoekers gebruiken ook op lipiden gebaseerde materialen, die meestal zeer effectief zijn. Ze kunnen ook virale DNA-vectoren gebruiken, evenals mechanische methoden zoals micro-injectie, waarbij het gewenste DNA rechtstreeks wordt geïnjecteerd om het risico van afbraak van het materiaal te verminderen. Gene guns zijn een ander populair hulpmiddel voor DNA-transfectie.
Wanneer een onderzoeker een transfectiereagens selecteert, zijn er een aantal overwegingen. Deze omvatten hoe het reagens zal worden gebruikt, om wat voor soort DNA het gaat en wat voor effecten de onderzoeker wil. Het transfectiereagens is niet altijd perfect betrouwbaar en de onderzoeker heeft ook een goede screeningstool nodig om de succesvol getransfecteerde cellen te vinden en te isoleren. Dit stelt de onderzoekers in staat om cellen die het nieuwe genetische materiaal niet accepteerden, samen met cellen die dat wel deden, weg te gooien, maar het op een ongebruikelijke manier tot expressie te brengen dat suggereert dat er enige degradatie van het DNA heeft plaatsgevonden.
DNA-transfectiereagenslijsten zijn verkrijgbaar bij life sciences-bedrijven. De meeste hebben een grafiek om onderzoekers te helpen beslissen welke te gebruiken, op basis van het celtype en wat voor soort genetisch materiaal de onderzoeker wil invoegen. Onderzoekers kunnen meestal monsters aanvragen om een reagens te testen voordat zij zich ertoe verbinden het in onderzoek te gebruiken. Het is belangrijk om de documentatie aandachtig te lezen om er zeker van te zijn dat de werking van het transfectiereagens vóór gebruik volledig wordt begrepen.