Hva er en transfeksjonsreagens?

Et transfeksjonsreagens er en bærer for DNA som en forsker kan bruke for å sette DNA inn i celler i kultur. En rekke typer reagenser er tilgjengelige gjennom life science-selskaper, og forskere kan også utvikle egne for tilpassede applikasjoner. Disse molekylene kan arbeide på en rekke forskjellige måter for å føre DNA inn i målcellene og sette det inn i deres genom. Den typiske prosessen innebærer blanding av ønsket DNA med reagenset, tilsetning til celler i kultur, inkubering av dem og deretter siling for å se hvilket som inneholder det nye DNAet.

DNA-transfeksjon er et veldig viktig forskningsverktøy. Forskere kan sette inn genetisk materiale for å slå på gener eller dempe dem, og kan bruke transfeksjon for å tvinge celler i kultur til å utføre på en spesiell måte. Målet kan være forbigående genetisk uttrykk for studiens formål. Det kan også være en permanent modifisering som gjør at forskeren kan lage en koloni av klonede celler som alle uttrykker det samme genet. Disse cellene kan brukes i forskning og kan ha terapeutiske anvendelser.

Kalsiumfosfat er en av de eldste transfeksjonsreagensene. Forskere bruker også lipidbaserte materialer, som har en tendens til å være svært effektive. De kan også bruke virale DNA-vektorer så vel som mekaniske metoder som mikroinjeksjon, der ønsket DNA injiseres direkte for å redusere risikoen for å nedbryte materialet. Genpistoler er et annet populært verktøy for DNA-transfeksjon.

Når en forsker velger en transfeksjonsreagens, er det en rekke hensyn. Disse inkluderer hvordan reagenset vil bli brukt, hva slags DNA det er snakk om, og hva slags effekter forskeren ønsker. Transfeksjonsreagenset er ikke alltid helt pålitelig, og forskeren trenger også et godt screeningsverktøy for å finne og isolere de vellykkede transfekterte cellene. Dette vil tillate forskerne å forkaste celler som ikke godtok det nye genetiske materialet sammen med celler som gjorde det, men uttrykker det på en uvanlig måte som antyder at noen nedbrytning av DNAet kan ha skjedd.

DNA-transfeksjonsreagenslister er tilgjengelige fra life science-selskaper. De fleste har et diagram for å hjelpe forskere med å bestemme hvilken de skal bruke, på grunnlag av celletype og hva slags arvestoff forskeren ønsker å sette inn. Forskere kan vanligvis be om prøver for å tillate dem å teste et reagens før de forplikter seg til bruk i forskning. Det er viktig å lese dokumentasjonen nøye for å sikre at driften av transfeksjonsreagenset blir fullstendig forstått før bruk.