O que é um reagente de transfecção?
Um reagente de transfecção é um transportador de DNA que um pesquisador pode usar para inserir o DNA nas células em cultura. Vários tipos de reagentes estão disponíveis nas empresas de ciências da vida, e os pesquisadores também podem desenvolver seus próprios aplicativos personalizados. Essas moléculas podem funcionar de várias maneiras diferentes para transportar o DNA para as células-alvo e inseri-lo em seu genoma. O processo típico envolve a mistura do DNA desejado com o reagente, adicionando-o às células em cultura, incubando-as e depois examinando-as para ver qual contém o novo DNA.
A transfecção de DNA é uma ferramenta de pesquisa muito importante. Os pesquisadores podem inserir material genético para ativar ou silenciar genes e podem usar a transfecção para forçar as células da cultura a atuar de uma maneira particular. O objetivo pode ser expressão genética transitória para fins de estudo. Também pode ser uma modificação permanente que permitirá ao pesquisador criar uma colônia de células clonadas, todas expressando o mesmo gene. Essas células podem ser usadas em pesquisas e podem ter aplicações terapêuticas.
O fosfato de cálcio é um dos reagentes de transfecção mais antigos. Os pesquisadores também usam materiais lipídicos, que tendem a ser altamente eficazes. Eles também podem usar vetores de DNA viral, bem como métodos mecânicos, como microinjeção, onde o DNA desejado é injetado diretamente para reduzir o risco de degradação do material. As armas gênicas são outra ferramenta popular para a transfecção de DNA.
Quando um pesquisador seleciona um reagente para transfecção, há várias considerações. Isso inclui como o reagente será usado, que tipo de DNA está envolvido e que tipo de efeito o pesquisador deseja. O reagente de transfecção nem sempre é perfeitamente confiável, e o pesquisador também precisa de uma boa ferramenta de triagem para encontrar e isolar as células transfectadas com sucesso. Isso permitirá que os pesquisadores descartem as células que não aceitaram o novo material genético junto com as células que o aceitaram, mas expressam-no de uma maneira incomum que sugere que alguma degradação do DNA pode ter ocorrido.
As listas de reagentes para transfecção de DNA estão disponíveis nas empresas de ciências da vida. A maioria possui um gráfico para ajudar os pesquisadores a decidir qual usar, com base no tipo de célula e em que tipo de material genético o pesquisador deseja inserir. Os pesquisadores geralmente podem solicitar amostras para permitir que testem um reagente antes de se comprometerem com seu uso na pesquisa. É importante ler a documentação cuidadosamente para garantir que a operação do reagente de transfecção seja totalmente compreendida antes do uso.