Co je transfekční činidlo?
Transfekční činidlo je nosič pro DNA, kterou může vědec použít k vložení DNA do buněk v kultuře. Prostřednictvím společností zabývajících se přírodními vědami je k dispozici řada typů činidel a vědci si mohou také vyvinout vlastní pro vlastní aplikace. Tyto molekuly mohou pracovat mnoha různými způsoby, jak přenášet DNA do cílových buněk a vložit ji do svého genomu. Typický proces zahrnuje smíchání požadované DNA s reakčním činidlem, přidání do buněk v kultuře, jejich inkubace a pak jejich screening, aby se zjistilo, které obsahují novou DNA.
Transfekce DNA je velmi důležitým výzkumným nástrojem. Vědci mohou vložit genetický materiál, aby je zapnuli nebo umlčeli geny, a mohou použít transfekci k tomu, aby donutili buňky v kultuře k určitému výkonu. Cílem může být přechodná genetická exprese pro účely studia. Může to být také stálá modifikace, která umožní výzkumníkovi vytvořit kolonii klonovaných buněk, které všechny exprimují stejný gen. Tyto buňky mohou být použity ve výzkumu a mohou mít terapeutické aplikace.
Fosforečnan vápenatý je jedním z nejstarších transfekčních činidel. Vědci také používají materiály na bázi lipidů, které bývají vysoce účinné. Mohou také použít virové DNA vektory, jakož i mechanické metody, jako je mikroinjekce, kde je požadovaná DNA přímo injikována, aby se snížilo riziko degradace materiálu. Genové zbraně jsou dalším populárním nástrojem pro transfekci DNA.
Když výzkumník vybere transfekční činidlo, existuje řada úvah. Patří sem to, jak bude činidlo použito, jaký druh DNA je zahrnut a jaké účinky chce výzkumný pracovník. Transfekční činidlo není vždy dokonale spolehlivé a výzkumný pracovník také potřebuje dobrý screeningový nástroj k nalezení a izolaci úspěšně transfekovaných buněk. To umožní vědcům zlikvidovat buňky, které nepřijaly nový genetický materiál, spolu s buňkami, které to udělaly, ale exprimovat jej neobvyklým způsobem, který naznačuje, že mohlo dojít k určité degradaci DNA.
Seznamy reagencií na transfekci DNA jsou k dispozici od společností biologických věd. Většina z nich má tabulku, která vědcům pomůže rozhodnout se, které použít, na základě typu buňky a jaké genetické látky chce vědec vložit. Vědci mohou obvykle požádat o vzorky, aby jim umožnili testovat činidlo před zahájením jeho použití ve výzkumu. Je důležité, abyste si pozorně přečetli tuto dokumentaci, abyste se ujistili, že před použitím je transfekční činidlo plně pochopeno.