Co to jest plama Giemsa?

Barwienie Giemsa to znormalizowana mieszanina barwników, dzięki której różne typy komórek wyraźnie się wyróżniają w rozmazie krwi lub cienkim skrawku tkanki. Ta plama nosi imię niemieckiego chemika Gustava Giemsy, który opracował ją po raz pierwszy w pracy nad badaniem pasożyta wywołującego malarię - Plasmodium . Aby zapewnić, że technik badający próbkę może uzyskać dokładny odczyt, kroki procedury barwienia muszą zostać znormalizowane, a także mieszanina barwników. Barwienie Giemsa nazywa się plamą różnicową, ponieważ daje różne kolory w zależności od tego, z czym się wiąże, na przykład cytoplazmy lub DNA.

Formuła bejcy Giemsa została z czasem dostosowana, aby poprawić stabilność barwników i powstających kolorów. Obecne standardowe mieszaniny obejmują błękit metylenowy, eozynę, a czasem lazur B. Barwniki te są często przechowywane w postaci sproszkowanej na sucho i mieszane z wodą tuż przed ich użyciem. Jeśli woda jest obecna w mieszaninie barwników przed jej użyciem, niektóre związki utleniają się i plamią niepoprawnie.

Dokładne etapy procedury stosowania barwienia Giemsa mogą się różnić w zależności od organizmu lub typu komórki, w którym badana jest próbka, a także od składu samej próbki. Próbka, która zostanie wybarwiona przy użyciu barwienia Giemsa jest zwykle rozmazana lub przymocowana do szkiełka wkrótce po pobraniu. Cienki rozmaz krwi jest zazwyczaj utrwalany przez zanurzenie w metanolu, podczas gdy gruby rozmaz krwi po prostu pozwala się całkowicie wyschnąć w temperaturze pokojowej. Następnie szkiełko namacza się w plamie przez określony czas, a następnie spłukuje wodą o neutralnym pH. Przed obejrzeniem szkiełka pozostawia się do wyschnięcia na powietrzu.

Z powodu różnicowego barwienia wytwarzanego przez barwienie Giemsa, cytoplazma Plasmodium wybarwia się na jasnoniebiesko, podczas gdy DNA wydaje się czerwony lub fioletowy. Inny pasożyt, Giardia lamblia, jest zabarwiony na różowo-fioletowy kolor, z wyjątkiem DNA, który zabarwia się bardzo ciemnoniebiesko. Histoplasma capsulatum, grzyb, występuje w postaci drożdży w ludzkich białych krwinkach i plamach ciemnoniebieskich.

Ten proces barwienia jest również pomocny w badaniach chromosomów i wizualizacji różnic między różnymi komórkami krwi. W niektórych sekcjach chromosom barwi się na bardzo ciemnoniebiesko, a na innych jasnoniebiesko. Powoduje to efekt pasmowania, który pomaga genetykom znaleźć miejsca, w których chromosomy przeszły niezwykłe zmiany. Czerwone krwinki zabarwiają się na różowo, a granulki w komórkach tucznych pojawiają się jako fioletowe plamki. Białe krwinki zabarwiają różne odcienie niebieskiego, pozwalając na odróżnienie różnych typów - bazofili, eozynofilów, neutrofili i innych - od siebie.