Was ist der Giemsa-Fleck?
Die Giemsa-Färbung ist eine standardisierte Farbstoffmischung, die verschiedene Zelltypen in einem Blutausstrich oder einer dünnen Gewebescheibe deutlich hervorhebt. Dieser Fleck ist nach dem deutschen Chemiker Gustav Giemsa benannt, der ihn erstmals für seine Arbeit zur Untersuchung des Malaria-Erregers Plasmodium entwickelt hat . Um sicherzustellen, dass der Techniker, der die Probe untersucht, einen genauen Messwert erhält, müssen die Schritte des Färbeverfahrens sowie die Farbstoffmischung standardisiert werden. Die Giemsa-Färbung wird als Differenzialfärbung bezeichnet, da sie je nach Bindung, z. B. Zytoplasma oder DNA, unterschiedliche Farben erzeugt.
Die Formel für die Giemsa-Färbung wurde im Laufe der Zeit angepasst, um die Stabilität der Farbstoffe und die resultierenden Farben zu verbessern. Aktuelle Standardmischungen schließen Methylenblau, Eosin und manchmal Azurblau B ein. Diese Farbstoffe werden oft in trockener Pulverform gelagert und kurz vor ihrer Verwendung mit Wasser gemischt. Wenn Wasser in der Farbstoffmischung vorhanden ist, bevor sie verwendet wird, oxidieren einige der Verbindungen und färben falsch.
Die genauen Schritte des Verfahrens zur Verwendung der Giemsa-Färbung können je nach dem Organismus oder Zelltyp, auf den die Probe untersucht wird, sowie der Zusammensetzung der Probe selbst variieren. Eine Probe, die mit dem Giemsa-Farbstoff angefärbt wird, wird in der Regel sehr bald nach der Entnahme auf einen Objektträger aufgeschmiert oder auf diesen geklebt. Ein dünner Blutausstrich wird im Allgemeinen durch Eintauchen in Methanol fixiert, während ein dicker Blutausstrich einfach bei Raumtemperatur vollständig trocknen gelassen wird. Der Objektträger wird dann für eine bestimmte Zeit in den Fleck eingeweicht und dann mit Wasser mit einem neutralen pH-Wert gespült. Die Objektträger dürfen vor dem Betrachten an der Luft trocknen.
Aufgrund der durch die Giemsa-Färbung hervorgerufenen unterschiedlichen Färbung färbt sich das Plasmodium- Zytoplasma hellblau, während die DNA rot oder violett erscheint. Ein anderer Parasit, Giardia lamblia, ist bis auf die DNA, die sich sehr dunkelblau färbt , rosa-lila gefärbt. Histoplasma capsulatum, ein Pilz, kommt in seiner Hefeform in den weißen Blutkörperchen des Menschen vor und färbt sich dunkelblau.
Dieser Färbevorgang ist auch bei Chromosomenstudien und bei der Visualisierung der Unterschiede zwischen verschiedenen Blutzellen hilfreich. Ein Chromosom färbt sich in einigen Bereichen sehr dunkelblau und in anderen hellblau. Dies führt zu einem Banding-Effekt, der den Genetikern hilft, Orte zu finden, an denen die Chromosomen ungewöhnliche Veränderungen durchlaufen haben. Rote Blutkörperchen färben sich rosa, während sich das Granulat in Mastzellen als violette Flecken zeigt. Weiße Blutkörperchen färben verschiedene Blautöne, so dass die verschiedenen Typen - Basophile, Eosinophile, Neutrophile und andere - voneinander unterschieden werden können.