Vad är Giemsa-fläcken?
Giemsa-fläcken är en standardiserad blandning av färgämnen som gör att olika celltyper sticker ut tydligt i en blodsmetning eller en tunn vävnadsskiva. Denna fläck är uppkallad efter den tyska kemisten, Gustav Giemsa, som först utvecklade den för sitt arbete med att studera parasiten som orsakar malaria - Plasmodium . För att säkerställa att teknikern som undersöker provet kan få en korrekt avläsning måste stegen i färgningsförfarandet standardiseras såväl som blandningen av färgämnen. Giemsa-fläck kallas en differentiell fläck eftersom den ger olika färger beroende på vad den binder till, till exempel cytoplasma eller DNA.
Formeln för Giemsa-fläck har justerats över tid för att förbättra stabiliteten hos färgämnena och färgerna som resulterar. Aktuella standardblandningar inkluderar metylenblått, eosin och ibland azurblått B. Dessa färgämnen lagras ofta i torr pulverform och blandas med vatten precis innan de används. Om vatten finns i färgämnesblandningen innan den används, oxiderar och färgar vissa av föreningarna felaktigt.
De exakta stegen i proceduren för användning av Giemsa-fläck kan variera beroende på vilken organisme eller celltyp provet undersöks såväl som själva provets sammansättning. Ett prov som kommer att färgas med hjälp av Giemsa-fläcken smutsas vanligtvis på eller fästas på ett objektglas strax efter det har samlats in. En tunn blodsmetning fixeras vanligtvis genom att doppas i metanol, medan en tjock blodsmetning helt enkelt får torka helt vid rumstemperatur. Objektglaset blöts sedan i fläcken under en viss tid och sköljs sedan med vatten som har ett neutralt pH. Slides får lufttorka innan de visas.
På grund av den differentiella färgningen som produceras av Giemsa-fläcken, plasmodiumcytoplasma färgar ljusblått medan DNA verkar rött eller lila. En annan parasit, Giardia lamblia, är tonad rosa-lila med undantag av DNA, som fläckar mycket mörkblått. Histoplasma capsulatum, en svamp, finns i sin jästform i mänskliga vita blodkroppar och fläckar mörkblå.
Denna färgningsprocess är också användbar i kromosomstudier och för att visualisera skillnaderna mellan olika blodceller. En kromosom fläckar mycket mörkblå i vissa delar och ljusblå i andra. Detta orsakar en bandningseffekt som hjälper genetiker att hitta platser där kromosomerna har genomgått ovanliga förändringar. Röda blodkroppar färgar rosa, medan granulerna i mastcellerna dyker upp som lila fläckar. Vita blodkroppar färgar olika nyanser av blått, vilket gör att de olika typerna - basofiler, eosinofiler, neutrofiler och andra - kan skiljas från varandra.