Hvad er Giemsa -pletten?
Giemsa Stain er en standardiseret blanding af farvestoffer, der får forskellige celletyper til at skille sig ud i en blodudstrygning eller tyndt væv. Denne plet er opkaldt efter den tyske kemiker, Gustav Giemsa, der først udviklede den til sit arbejde med at studere den parasit, der forårsager malaria - Plasmodium . For at sikre, at teknikeren, der undersøger prøven, kan opnå en nøjagtig læsning, skal trinene til farvningsproceduren standardiseres såvel som blandingen af farvestoffer. Giemsa -plet kaldes en differentiel plet, fordi den producerer forskellige farver afhængigt af hvad den binder til, såsom cytoplasma eller DNA.
Formlen for GIEMSA -plet er blevet justeret over tid for at forbedre farvestoffets stabilitet og de farver, der resulterer. Aktuelle standardblandinger inkluderer methylenblå, eosin og undertiden azurblå B. Disse farvestoffer opbevares ofte i en tør pulveriseret form og blandes med vand lige før de bruges. Hvis der findes vand i farvestofblandingen, før den bruges,Nogle af forbindelserne oxideres og pletter forkert.
De nøjagtige trin i proceduren til anvendelse af Giemsa -plet kan variere afhængigt af hvilken organisme eller celletype prøven undersøges for såvel som sammensætningen af selve prøven. En prøve, der bliver farvet ved hjælp af Giemsa -pletten, smøres normalt på eller fastgøres til et lysbillede meget kort efter, at den er opsamlet. En tynd blodudstrygning fastgøres generelt ved at blive dyppet i methanol, mens en tyk blodudstrygning simpelthen får lov til at tørre helt ved stuetemperatur. Slippet er derefter gennemvædet i pletten i en bestemt tidsperiode og skylles derefter med vand, der har en neutral pH. Slides får lov til at lufttørre, før de ser.
På grund af den differentielle farvning, der er produceret af GIEMSA -plet, plasmodium cytoplasma -pletter lyseblå, mens DNA'et forekommer rød eller lilla. En anden parasit, giardia lamblia, er tonet lyserød-purple undtagen for DNA'et, der pletter meget mørkeblå. histoplasma kapselatum, en svamp, findes i dens gærform i humane hvide blodlegemer og pletter mørkeblå.
Denne farvningsproces er også nyttig i kromosomundersøgelser og ved at visualisere forskellene mellem forskellige blodlegemer. En kromosom pletter meget mørkeblå i nogle sektioner og lyseblå i andre. Dette medfører en bandingseffekt, der hjælper genetikere med at finde steder, hvor kromosomerne har gennemgået usædvanlige ændringer. Røde blodlegemer pletter lyserosa, mens granulaterne i mastceller vises som lilla pletter. Hvide blodlegemer pletter forskellige nuancer af blå, hvilket gør det muligt for de forskellige typer - basofiler, eosinofiler, neutrofiler og andre - at blive adskilt fra hinanden.