Co je Giemsa Stain?

Giemsa skvrna je standardizovaná směs barviv, díky nimž různé typy buněk jasně vynikají v krevním nátěru nebo v tenkém plátku tkáně. Tato skvrna je pojmenována pro německého chemika Gustava Giemsy, který ji poprvé vyvinul pro svou práci při studiu parazita, který způsobuje malárii - Plasmodium . Aby bylo zajištěno, že technik, který zkoumá vzorek, může dosáhnout přesného odečtu, musí být standardizovány kroky barvicího postupu a směs barviv. Giemsa skvrna se nazývá diferenciální skvrna, protože vytváří různé barvy v závislosti na tom, na co se váže, jako je cytoplazma nebo DNA.

Vzorec pro barvení Giemsa byl postupem času upraven, aby se zlepšila stabilita barviv a výsledných barev. Současné standardní směsi zahrnují methylenovou modrou, eosin a někdy azurovou B. Tato barviva jsou často skladována v suché práškové formě a smíchána s vodou těsně před použitím. Pokud je ve směsi barviv před použitím voda, některé ze sloučenin budou oxidovat a nesprávně barvit.

Přesné kroky postupu při použití barvení Giemsa se mohou lišit v závislosti na organismu nebo typu buňky, ve které je vzorek zkoumán, a na složení samotného vzorku. Vzorek, který bude obarven pomocí Giemsa skvrny, je obvykle na sklíčko rozmazán nebo nalepen na sklíčko velmi brzy poté, co je odebrán. Tenká krevní nátěr je obvykle fixován ponořením do methanolu, zatímco tlustý krevní nátěr je jednoduše ponechán zcela vyschnout při pokojové teplotě. Sklíčko se potom na skvrnu po určitou dobu namočí a poté se propláchne vodou, která má neutrální pH. Sklíčka se před pozorováním nechají uschnout na vzduchu.

Kvůli rozdílnému zbarvení způsobenému barvením Giemsa zbývá cytoplazma Plasmodium světle modrou, zatímco DNA je červená nebo fialová. Další parazit, Giardia lamblia, je zbarven růžovo-fialový, s výjimkou DNA, která značí velmi tmavě modrou barvu. Histoplasma capsulatum, houba, se nachází ve své kvasinkové formě v lidských bílých krvinek a skvrny tmavě modré.

Tento proces barvení je také užitečný v chromozomálních studiích a ve vizualizaci rozdílů mezi různými krevními buňkami. Chromozom obarví v některých částech velmi tmavě modrou a v jiných světle modrou. To způsobuje pruhovací efekt, který pomáhá genetikům najít místa, kde chromozomy prošly neobvyklými změnami. Červené krvinky zbarví růžově, zatímco granule v žírných buňkách se projevují jako fialové skvrny. Bílé krvinky barví různé odstíny modré, což umožňuje odlišit různé typy - bazofily, eozinofily, neutrofily a další.