Qual é a mancha de Giemsa?
A coloração Giemsa é uma mistura padronizada de corantes que faz com que diferentes tipos de células se destaquem claramente em uma amostra de sangue ou em uma fatia fina de tecido. Essa mancha recebeu o nome do químico alemão Gustav Giemsa, que a desenvolveu primeiro por seu trabalho no estudo do parasita causador da malária - o Plasmodium . Para garantir que o técnico que examina a amostra possa obter uma leitura precisa, as etapas do procedimento de coloração devem ser padronizadas, bem como a mistura de corantes. A mancha de Giemsa é chamada de mancha diferencial, porque produz cores diferentes, dependendo do que se liga, como citoplasma ou DNA.
A fórmula da mancha Giemsa foi ajustada ao longo do tempo para melhorar a estabilidade dos corantes e das cores resultantes. As misturas padrão atuais incluem azul de metileno, eosina e às vezes azul B. Esses corantes são frequentemente armazenados em pó seco e misturados com água antes de serem usados. Se a água estiver presente na mistura de corantes antes de ser usada, alguns dos compostos irão oxidar e manchar incorretamente.
As etapas exatas do procedimento para o uso da coloração Giemsa podem variar dependendo de qual organismo ou tipo de célula a amostra está sendo examinada, bem como a composição da própria amostra. Uma amostra que será manchada com a mancha Giemsa geralmente é manchada ou afixada a uma lâmina logo após ser coletada. Um esfregaço fino de sangue geralmente é corrigido por imersão em metanol, enquanto um esfregaço grosso de sangue é simplesmente deixado secar completamente à temperatura ambiente. A lâmina é então embebida na mancha por um período determinado e depois enxaguada com água com pH neutro. Os slides podem secar ao ar antes da visualização.
Devido à coloração diferencial produzida pela coloração Giemsa, o citoplasma de Plasmodium mancha azul claro enquanto o DNA parece vermelho ou roxo. Outro parasita, Giardia lamblia, é de cor púrpura-rosa, exceto pelo DNA, que mancha muito azul escuro. O Histoplasma capsulatum, um fungo, é encontrado em sua forma de levedura nos glóbulos brancos humanos e manchas em azul escuro.
Esse processo de coloração também é útil nos estudos cromossômicos e na visualização das diferenças entre as várias células sanguíneas. Um cromossomo mancha muito azul escuro em algumas seções e azul claro em outras. Isso causa um efeito de bandas que ajuda os geneticistas a encontrar lugares onde os cromossomos passaram por mudanças incomuns. Os glóbulos vermelhos ficam cor de rosa, enquanto os grânulos nos mastócitos aparecem como manchas roxas. Os glóbulos brancos mancham vários tons de azul, permitindo que os diferentes tipos - basófilos, eosinófilos, neutrófilos e outros - sejam distinguidos um do outro.