Was ist eine Antikörperfärbung?
Bei der Antikörperfärbung handelt es sich um ein Laborverfahren, mit dem eine Probe gefärbt wird, um das Vorhandensein bestimmter Antigene in einer Probe nachzuweisen oder Antigene hervorzuheben, damit sie klar sichtbar sind. Abhängig von der Probe und der Präferenz des Technikers können verschiedene Verfahren zur Färbung von Antikörpern angewendet werden. Diese Technik wird in vielen Regionen auf Hochschul- und Universitätsniveau gelehrt, und an Gymnasien mit fortgeschrittenen wissenschaftlichen Programmen können die Schüler auch das Färben von Antikörpern erlernen.
Beim Färben von Antikörpern wird ein Antikörper in eine Probe eingebracht, beispielsweise in eine Kratz- oder Biopsieprobe. Wenn die Probe Antigene enthält, auf die der Antikörper reagiert, bindet er sich an diese. Wenn die Probe gewaschen wird, werden die überschüssigen Antikörper weggespült und hinterlassen die Antikörper, die an der Probe gebunden sind. Wenn der Forscher konjugierte Antikörper mit angebrachten fluoreszierenden Markierungen verwendet, leuchtet die Probe unter der richtigen Beleuchtung auf und verrät das Vorhandensein der fraglichen Antikörper.
In anderen Fällen müssen Personen einen sekundären Antikörper verwenden. Nach dem Waschen der Probe geben sie den sekundären Antikörper hinzu, ein Präparat mit einem angebrachten fluoreszierenden Tag. Der sekundäre Antikörper bindet sich an die primären Antikörper in der Probe und fluoresziert unter Licht wie oben beschrieben. Die Fluoreszenz kann zur Diagnose von Krankheiten verwendet werden, wobei Labortechniker Proben auf Antigene untersuchen, die mit bestimmten Krankheiten assoziiert sind. Sie kann auch verwendet werden, um Anzeichen einer Kontamination zu suchen und das Vorhandensein von Antigenen aus anderen Gründen zu identifizieren.
In der Mikroskopie kann eine Antikörperfärbung manchmal hilfreich sein, um bestimmte Strukturen hervorzuheben. Selbst bei einer hervorragenden Auflösung kann die Mikroskopie manchmal schwierig zu sehen sein und es kann schwierig sein, verborgene oder kleine Strukturen im Bild zu erkennen. Mithilfe der Antikörperfärbung können Personen eine Flagge erstellen, mit der sich interessierende Strukturen, wie bestimmte Gewebetypen oder Strukturen in Zellen, leicht identifizieren und umreißen lassen. Die Fluoreszenz ist an allen Stellen des Objektträgers zu sehen, an denen der interessierende Antikörper vorhanden ist, wodurch Strukturen in der Probe kartiert werden.
Die Antikörperfärbung erfordert den Zugang zu Laborgeräten, Antikörpern und verschiedenen Lösungen, die während des Fixierens und Konservierens von Proben verwendet werden. Es ist wichtig, das Verfahren ordnungsgemäß durchzuführen, um Verunreinigungen und Fehler zu vermeiden, z. B. dass Lösungen zu lange auf einer Probe sitzen und die Ergebnisse verdecken oder verwechseln. In vielen Labors gibt es ein Handbuch, dem die Mitarbeiter folgen. Wenn sie Materialien für die Forschung vorbereiten, beschreiben die Mitarbeiter ihre Methoden detailliert, damit ihre Arbeit reproduziert werden kann.