Qu'est-ce que la coloration par anticorps?
La coloration aux anticorps est une procédure de laboratoire utilisée pour colorer un échantillon afin de détecter la présence de certains antigènes dans un échantillon ou pour mettre en évidence des antigènes afin qu'ils puissent être clairement vus. Il existe un certain nombre de procédures de coloration d'anticorps différentes qui peuvent être utilisées, en fonction de l'échantillon et de la préférence du technicien. Cette technique est enseignée au niveau collégial et universitaire dans de nombreuses régions et dans les écoles secondaires dotées de programmes scientifiques avancés, les étudiants peuvent également apprendre à colorer leurs anticorps.
Dans la coloration d'anticorps, un anticorps est introduit dans un échantillon tel qu'un grattage ou une biopsie. S'il y a des antigènes dans l'échantillon auxquels l'anticorps va réagir, il s'y verrouille. Lorsque l'échantillon est lavé, les anticorps en excès seront éliminés, laissant les anticorps qui se sont bloqués sur l'échantillon. Si le chercheur utilise des anticorps conjugués avec des étiquettes fluorescentes, l’échantillon s’éclaire sous l’éclairage approprié, trahissant la présence des anticorps en question.
Dans d'autres cas, les personnes doivent utiliser un anticorps secondaire. Après le lavage de l'échantillon, ils ajoutent l'anticorps secondaire, une préparation avec une étiquette fluorescente attachée. L'anticorps secondaire se fixe aux anticorps primaires de l'échantillon et émet une fluorescence à la lumière, comme indiqué ci-dessus. La fluorescence peut être utilisée pour le diagnostic de maladies, les techniciens de laboratoire recherchant des antigènes associés à des maladies spécifiques dans les échantillons. Elle peut également être utilisée pour rechercher des signes de contamination et pour identifier la présence d'antigènes pour d'autres raisons.
En microscopie, la coloration des anticorps peut parfois être utile pour mettre en évidence certaines structures. Même avec une excellente résolution, la microscopie peut parfois être difficile à visualiser, et il peut être difficile de sélectionner des structures cachées ou petites dans l'image. L'utilisation de la coloration par anticorps permet aux personnes de créer un drapeau pour identifier et décrire facilement les structures d'intérêt, telles que des types particuliers de tissus ou des structures à l'intérieur de cellules. La fluorescence sera visible à tous les endroits de la diapositive où l'anticorps d'intérêt est présent, en cartographiant les structures de l'échantillon.
La coloration des anticorps nécessite l'accès à du matériel de laboratoire, des anticorps et diverses solutions utilisées au cours du processus de fixation et de conservation des échantillons. Il est important de suivre correctement la procédure pour éviter la contamination et les erreurs telles que permettre aux solutions de rester sur un échantillon trop longtemps, obscurcissant ou confondant les résultats. Les membres de leur personnel suivent un manuel dans de nombreux laboratoires. Lors de la préparation du matériel de recherche, les participants décriront leurs méthodes en détail afin de pouvoir reproduire leur travail.