Che cos'è la colorazione anticorpale?
La colorazione di anticorpi è una procedura di laboratorio utilizzata per colorare un campione per rilevare la presenza di determinati antigeni in un campione o per evidenziare gli antigeni in modo che possano essere chiaramente visualizzati. Esistono diverse procedure di colorazione degli anticorpi che possono essere utilizzate, a seconda del campione e delle preferenze del tecnico. Questa tecnica viene insegnata a livello universitario e universitario in molte regioni e nelle scuole superiori con programmi scientifici avanzati, gli studenti possono anche imparare la colorazione degli anticorpi.
Nella colorazione di anticorpi, un anticorpo viene introdotto in un campione come una raschiatura o una biopsia. Se nel campione sono presenti antigeni a cui l'anticorpo reagirà, si blocca su di essi. Quando il campione viene lavato, gli anticorpi in eccesso verranno lavati via, lasciando gli anticorpi bloccati sul campione. Se il ricercatore utilizza anticorpi coniugati con etichette fluorescenti attaccate, il campione si illuminerà sotto la corretta illuminazione, tradendo la presenza degli anticorpi in questione.
In altri casi, le persone devono usare un anticorpo secondario. Dopo aver lavato il campione, aggiungono l'anticorpo secondario, una preparazione con un'etichetta fluorescente attaccata. L'anticorpo secondario si attacca agli anticorpi primari nel campione e fluirà alla luce come discusso sopra. La fluorescenza può essere utilizzata nella diagnosi della malattia, con i tecnici di laboratorio che controllano i campioni per verificare la presenza di antigeni associati a malattie specifiche e può anche essere utilizzata per cercare segni di contaminazione e identificare la presenza di antigeni per altri motivi.
In microscopia, la colorazione di anticorpi può talvolta essere utile per evidenziare determinate strutture. Anche con una risoluzione eccellente, la microscopia a volte può essere difficile da visualizzare e può essere difficile individuare strutture nascoste o piccole nell'immagine. L'uso della colorazione anticorpale consente alle persone di creare una bandiera per identificare e delineare facilmente le strutture di interesse, come particolari tipi di tessuto o strutture all'interno delle cellule. La fluorescenza sarà osservata in tutte le posizioni sulla diapositiva in cui è presente l'anticorpo di interesse, mappando le strutture nel campione.
La colorazione di anticorpi richiede l'accesso alle apparecchiature di laboratorio, agli anticorpi e alle varie soluzioni utilizzate durante il processo di fissaggio e conservazione dei campioni. È importante eseguire correttamente la procedura per evitare contaminazioni ed errori come consentire alle soluzioni di rimanere su un campione troppo a lungo, oscurando o confondendo i risultati. Molti laboratori hanno un manuale che i membri del loro personale seguono e quando preparano i materiali per la ricerca, le persone descriveranno i loro metodi in dettaglio in modo che il loro lavoro possa essere replicato.