O que é coloração de anticorpos?
A coloração com anticorpos é um procedimento de laboratório usado para manchar uma amostra para detectar a presença de certos antígenos em uma amostra ou para destacar antígenos para que possam ser claramente vistos. Existem vários procedimentos diferentes de coloração de anticorpos que podem ser usados, dependendo da amostra e da preferência do técnico. Essa técnica é ensinada no nível da faculdade e da universidade em muitas regiões e, em escolas de ensino médio com programas de ciências avançadas, os alunos também podem aprender a coloração de anticorpos. Se houver antígenos na amostra a que o anticorpo reagirá, ele trava neles. Quando a amostra é lavada, o excesso de anticorpos será lavado, deixando para trás os anticorpos que travaram a amostra. Se o pesquisador estiver usando anticorpos conjugados com etiquetas fluorescentes anexadas, a amostra iluminará a iluminação adequada, traindo a presença dos anticorpos em Question.
Em outros casos, as pessoas devem usar um anticorpo secundário. Depois de lavar a amostra, eles adicionam o anticorpo secundário, uma preparação com uma etiqueta fluorescente conectada. O anticorpo secundário se liga aos anticorpos primários na amostra e fluorescerá sob luz, conforme discutido acima. A fluorescência pode ser usada no diagnóstico de doenças, com técnicos de laboratório verificando amostras para antígenos associados a doenças específicas, e também pode ser usada para procurar sinais de contaminação e identificar a presença de antígenos por outros motivos.
Na microscopia, a coloração de anticorpos às vezes pode ser útil para destacar certas estruturas. Mesmo com excelente resolução, às vezes pode ser difícil ver a microscopia, e pode ser um desafio escolher estruturas escondidas ou pequenas na imagem. Usar a coloração de anticorpos permite que as pessoas criem uma bandeira para identificar e delinear facilmente STRUCustos de interesse, como tipos específicos de tecido ou estruturas dentro das células. A fluorescência será vista em todos os locais no slide onde está presente o anticorpo de interesse, mapeando estruturas na amostra.
A coloração com anticorpos requer acesso a equipamentos de laboratório, anticorpos e várias soluções usadas durante o processo de fixação e preservação de amostras. É importante executar o procedimento adequadamente para evitar contaminação e erros, como permitir que as soluções fiquem em uma amostra por muito tempo, obscurecendo ou confundindo os resultados. Muitos laboratórios têm um manual que seus funcionários seguem e, ao preparar materiais para pesquisa, as pessoas descrevem seus métodos em detalhes para que seu trabalho possa ser replicado.