O que é coloração de anticorpos?
A coloração de anticorpos é um procedimento de laboratório usado para corar uma amostra para detectar a presença de certos antígenos em uma amostra ou destacar antígenos para que possam ser vistos com clareza. Existem vários procedimentos diferentes de coloração de anticorpos que podem ser utilizados, dependendo da amostra e da preferência do técnico. Essa técnica é ensinada em faculdades e universidades em muitas regiões e, nas escolas secundárias com programas avançados de ciências, os alunos também podem aprender a coloração de anticorpos.
Na coloração de anticorpos, um anticorpo é introduzido em uma amostra, como raspagem ou biópsia. Se houver antígenos na amostra aos quais o anticorpo reagirá, ele se prende a eles. Quando a amostra é lavada, o excesso de anticorpos é lavado, deixando para trás os anticorpos bloqueados na amostra. Se o pesquisador estiver usando anticorpos conjugados com etiquetas fluorescentes anexadas, a amostra acenderá sob a iluminação adequada, traindo a presença dos anticorpos em questão.
Em outros casos, as pessoas devem usar um anticorpo secundário. Após a lavagem da amostra, eles adicionam o anticorpo secundário, uma preparação com uma etiqueta fluorescente anexada. O anticorpo secundário se liga aos anticorpos primários na amostra e irá fluorescir sob a luz, conforme discutido acima. A fluorescência pode ser usada no diagnóstico de doenças, com técnicos de laboratório verificando amostras quanto a antígenos associados a doenças específicas, e também pode ser usada para procurar sinais de contaminação e identificar a presença de antígenos por outros motivos.
Em microscopia, a coloração de anticorpos às vezes pode ser útil para destacar certas estruturas. Mesmo com excelente resolução, às vezes a microscopia pode ser difícil de visualizar e pode ser um desafio escolher estruturas pequenas ou ocultas na imagem. O uso da coloração de anticorpos permite que as pessoas criem uma bandeira para identificar e delinear facilmente estruturas de interesse, como tipos específicos de tecido ou estruturas dentro das células. A fluorescência será vista em todos os locais da lâmina onde o anticorpo de interesse está presente, mapeando as estruturas da amostra.
A coloração de anticorpos requer acesso a equipamentos de laboratório, anticorpos e várias soluções usadas durante o processo de fixação e preservação de amostras. É importante executar o procedimento corretamente para evitar contaminação e erros, como permitir que as soluções permaneçam em uma amostra por muito tempo, obscurecendo ou confundindo os resultados. Muitos laboratórios têm um manual que seus funcionários seguem e, ao preparar materiais para pesquisa, as pessoas descrevem seus métodos em detalhes para que seu trabalho possa ser replicado.