Hva er en molekylvektmarkør?
En molekylvektmarkør er et molekyl som brukes til å gi et estimat av størrelsen på molekyler utsatt for gelelektroforese. Dette er en teknikk der DNA, RNA eller proteiner skilles med størrelse ved bruk av en elektrisk strøm på en gel. Dette uttrykket skal ikke forveksles med molekylære markører i genetikk - områder der en organisms DNA skiller seg fra resten av populasjonen og kan identifiseres med en DNA -sonde.
Proteinmolekylvektmarkører blir ofte brukt når proteiner skilles ved gelelektrofer. Molekylvektmarkøren er en gruppe proteiner med kjent molekylvekt, som vanligvis er gitt av bioteknologiselskaper i et bestemt størrelsesområde. Man velger størrelsesområdet basert på prøvene som studeres. Molekylvektmarkørene lastes sammen og skilles ut under løpeturen. Ved å måle avstanden som er tilbakelagt av markørene og proteinet av interesse, kan man bestemme størrelsen på det eksperimentelle proteinet.
Different TYPES av markører kan visualiseres på forskjellige måter. Noen av molekylære markørene er umerkede og er farget i gelen med resten av proteinene. De er ikke synlige før hele gelen er farget. Andre typer proteinmolekylære markører kommer forhåndsfarget med farger, og hver type protein er en annen farge. Separasjonen er synlig når gelen kjører.
En fordel med en forhåndsfarget molekylvektmarkør er for Western Blots. Dette er en teknikk der proteinene overføres til en membran og deretter farges med antistoffer for å oppdage et bestemt protein. Å ha fargede markører hjelper til med å bestemme om overføringen av proteinene er fullført før man fortsetter med resten av prosedyren.
Molekylvektmarkører brukes ofte til å analysere DNA på geler. Ofte er DNA -molekylære markører laget av bakterieviruset lambda . Begrensning EnzyMES er laget av bakterier for å fordøye DNA fra invaderende organismer, og restriksjonsenzymet Hindiii brukes ofte til å nedbryte lambda -DNA. Den produserer en serie med forskjellige størrelse, reproduserbare fragmenter kjent som en DNA-stige . Ved å sammenligne avstanden som drives av standardene i en logaritmisk skala, kan man bestemme størrelsen på DNA -fragmentene som blir analysert.
Denne DNA -molekylvektmarkøren kan brukes til å analysere størrelsen på DNA produsert under isolering av gener og i gentekniske eksperimenter. Det kan også brukes under polymerasekjedereaksjonen (PCR), der små mengder DNA eller RNA forsterkes for å produsere store mengder produkt. PCR -teknikker er ofte assosiert med farskapstesting og rettsvitenskap, men de er også veldig vanlige innen medisinsk og grunnleggende biologisk forskning. Spesielle molekylvektmarkører er tilgjengelige for mindre produkter generert fra noen typer PCR eller små RNA -molekyler.