Qu'est-ce qu'un marqueur de poids moléculaire?
Un marqueur de poids moléculaire est une molécule utilisée pour fournir une estimation de la taille des molécules soumises à une électrophorèse sur gel.Il s'agit d'une technique dans laquelle l'ADN, l'ARN ou les protéines sont séparés par la taille, en utilisant un courant électrique sur un gel.Ce terme ne doit pas être confondu avec les marqueurs moléculaires dans la génétique et le mdash;Les zones dans lesquelles l'ADN d'un organisme diffère du reste de la population et peuvent être identifiés avec une sonde d'ADN.
Les marqueurs de poids moléculaire des protéines sont couramment utilisés lorsque les protéines sont séparées par électrophorèse sur gel.Le marqueur de poids moléculaire est un groupe de protéines de poids moléculaire connu, qui sont généralement fournies par les sociétés de biotechnologie dans une plage de taille particulière.On choisit la plage de taille basée sur les échantillons étudiés.Les marqueurs de poids moléculaire sont chargés ensemble et se séparent pendant la course.En mesurant la distance parcourue par les marqueurs et la protéine d'intérêt, on peut déterminer la taille de la protéine expérimentale.
Différents types de marqueurs peuvent être visualisés de différentes manières.Certains des marqueurs moléculaires ne sont pas étiquetés et sont colorés dans le gel avec le reste des protéines.Ils ne sont pas visibles tant que tout le gel n'est pas coloré.D'autres types de marqueurs moléculaires protéiques sont pré-colorés avec des couleurs, et chaque type de protéine est d'une couleur différente.La séparation est visible lorsque le gel est en cours d'exécution.
Un avantage d'un marqueur de poids moléculaire pré-coloré est pour Western Blots.Il s'agit d'une technique dans laquelle les protéines sont transférées dans une membrane puis colorées avec des anticorps pour détecter une protéine particulière.Le fait d'avoir des marqueurs colorés aide à déterminer si le transfert des protéines est terminé avant que l'on ne continue avec le reste de la procédure.
Les marqueurs de poids moléculaire sont couramment utilisés pour analyser l'ADN sur les gels.Fréquemment, les marqueurs moléculaires de l'ADN sont fabriqués à partir du virus bactérien lambda .Les enzymes de restriction sont fabriquées par des bactéries pour digérer l'ADN des organismes envahisseurs, et l'enzyme de restriction hindiii est souvent utilisée pour dégrader l'ADN lambda.Il produit une série de fragments reproductibles de taille différemment connus sous le nom d'une échelle d'ADN .En comparant la distance exécutée par les normes sur une échelle logarithmique, on peut déterminer la taille des fragments d'ADN analysés.
Ce marqueur de poids moléculaire d'ADN peut être utilisé pour analyser la taille de l'ADN produit pendant l'isolement des gènes et dansExpériences de génie génétique.Il peut également être utilisé pendant la réaction en chaîne en polymérase (PCR), dans laquelle de petites quantités d'ADN ou d'ARN sont amplifiées pour produire de grandes quantités de produit.Les techniques de PCR sont généralement associées aux tests de paternité et aux sciences médico-légales, mais elles sont également très courantes dans la recherche biologique médicale et fondamentale.Des marqueurs de poids moléculaire spéciaux sont disponibles pour les petits produits générés à partir de certains types de PCR ou de petites molécules d'ARN.