分子量マーカーとは何ですか?
分子量マーカーは、ゲル電気泳動にかけられる分子のサイズの推定値を提供するために使用される分子です。 これは、ゲル上の電流を使用して、DNA、RNA、またはタンパク質をサイズで分離する手法です。 この用語は、遺伝学の分子マーカーと混同されるべきではありません-生物のDNAが人口の他の部分と異なり、DNAプローブで識別できる領域。
タンパク質をゲル電気泳動で分離する場合、タンパク質分子量マーカーが一般的に使用されます。 分子量マーカーは、既知の分子量のタンパク質のグループであり、特定のサイズ範囲で一般にバイオテクノロジー企業によって提供されます。 研究対象のサンプルに基づいてサイズ範囲を選択します。 分子量マーカーは一緒にロードされ、実行中に分離されます。 マーカーと目的のタンパク質が移動した距離を測定することにより、実験タンパク質のサイズを決定できます。
さまざまな種類のマーカーをさまざまな方法で視覚化できます。 一部の分子マーカーは標識されておらず、残りのタンパク質とともにゲル内で染色されています。 ゲル全体が染色されるまで、それらは見えません。 他のタイプのタンパク質分子マーカーは色であらかじめ染色されており、各タイプのタンパク質は異なる色です。 ゲルが流れている間、分離が見えます。
染色済み分子量マーカーの利点の1つは、ウエスタンブロットです。 これは、タンパク質を膜に転写し、抗体で染色して特定のタンパク質を検出する手法です。 マーカーに色を付けると、残りの手順を進める前にタンパク質の移動が完了したかどうかを判断できます。
分子量マーカーは、ゲル上のDNAの分析によく使用されます。 多くの場合、DNA分子マーカーは細菌ウイルスlambdaから作成されます。 制限酵素はバクテリアによって作られ、侵入生物のDNAを消化します。制限酵素HindIIIは、ラムダDNAの分解によく使用されます。 DNAラダーとして知られる一連の異なるサイズの再現可能なフラグメントを生成します。 標準が実行した距離を対数スケールで比較することにより、分析中のDNA断片のサイズを決定できます。
このDNA分子量マーカーは、遺伝子の単離中および遺伝子工学実験で生成されたDNAのサイズを分析するために使用できます。 少量のDNAまたはRNAを増幅して大量の産物を生成するポリメラーゼ連鎖反応 (PCR)でも使用できます。 PCR技術は一般に父子鑑定および法医学に関連していますが、医学および基礎生物学の研究でも非常に一般的です。 特殊な分子量マーカーは、一部のタイプのPCRまたは低分子RNA分子から生成された小さな製品に使用できます。