O que é um marcador de peso molecular?

Um marcador de peso molecular é uma molécula usada para fornecer uma estimativa do tamanho das moléculas submetidas a eletroforese em gel. Esta é uma técnica na qual DNA, RNA ou proteínas são separadas por tamanho, usando uma corrente elétrica em um gel. Este termo não deve ser confundido com marcadores moleculares na genética - áreas nas quais o DNA de um organismo difere do restante da população e pode ser identificado com uma sonda de DNA. O marcador de peso molecular é um grupo de proteínas de peso molecular conhecido, que geralmente são fornecidas por empresas de biotecnologia em uma faixa de tamanho específica. Um escolhe a faixa de tamanho com base nas amostras que estão sendo estudadas. Os marcadores de peso molecular são carregados juntos e separados durante a corrida. Ao medir a distância percorrida pelos marcadores e a proteína de interesse, pode -se determinar o tamanho da proteína experimental.

Ty diferentePES de marcadores podem ser visualizados de diferentes maneiras. Alguns dos marcadores moleculares não são identificados e são corados no gel com o restante das proteínas. Eles não são visíveis até que todo o gel esteja manchado. Outros tipos de marcadores moleculares de proteína vêm pré-corados com cores, e cada tipo de proteína é uma cor diferente. A separação é visível enquanto o gel está em execução.

Uma vantagem de um marcador de peso molecular pré-corado é para Western Blots. Esta é uma técnica na qual as proteínas são transferidas para uma membrana e depois coradas com anticorpos para detectar uma proteína específica. Ter marcadores coloridos ajuda a determinar se a transferência das proteínas está completa antes de prosseguir com o restante do procedimento.

Os marcadores de peso molecular são comumente usados ​​para analisar o DNA em géis. Freqüentemente, os marcadores moleculares de DNA são feitos do vírus bacteriano lambda . Restrição ENZYMES são feitos por bactérias para digerir o DNA dos organismos invasores, e a enzima de restrição hindiii é frequentemente usada para degradar o DNA lambda. Produz uma série de fragmentos reprodutíveis de tamanho diferente e conhecidos como uma escada DNA . Ao comparar a distância executada pelos padrões em uma escala logarítmica, pode -se determinar o tamanho dos fragmentos de DNA sendo analisados.

Esse marcador de peso molecular do DNA pode ser usado para analisar o tamanho do DNA produzido durante o isolamento de genes e em experimentos de engenharia genética. Também pode ser usado durante a reação em cadeia da polimerase (PCR), na qual pequenas quantidades de DNA ou RNA são amplificadas para produzir grandes quantidades de produto. As técnicas de PCR são comumente associadas aos testes de paternidade e ciências forenses, mas também são muito comuns em pesquisas biológicas médicas e básicas. Marcadores especiais de peso molecular estão disponíveis para produtos menores gerados a partir de alguns tipos de PCR ou pequenas moléculas de RNA.