Hva er Western blot?
A Western blot er en laboratorieanalyseteknikk som brukes til å isolere proteiner. Det kan brukes i diagnosen visse sykdommer, og også i forskning på forskjellige proteiner og prosesser. Berømt er Western blot knyttet til diagnose av HIV -infeksjon, men den kan også brukes til å se etter spor av bovint spongiform encefalitt (BSE) og Lyme -sykdom. Prøver sendt ut for testing med en Western blot -protokoll kan returnere resultater om noen dager til flere uker, avhengig av laboratoriekapasiteten og presset.
I en Western blot blir prøven, som kan være fra blod eller vev, først sett gjennom elektroforese slik at proteinene vil skille ut etter lengde. En stripe av elektroforesegelen med isolerte proteiner i mållengden kan brukes til å overføre proteinene til et nitrocellulosesubstrat for neste trinn i testen. I løpet av dette stadiet blir et antistoff introdusert for prøven, med mål om å merke proteinene med antigener som antistoffet låser on til.
Når proteinene er tagget, kan de lett identifiseres. Når det gjelder testing for sykdom, indikerer tilstedeværelsen av et reaktivt protein at prøven har testet positivt. Western blots returnerer sjelden falske positiver, selv om det kan skje av og til, og de kan også returnere falske negativer, der en person faktisk har en sykdom, men det vises ikke på Western blot -testing. Dette kan være spesielt vanlig i tilfeller når det sykdomsfremkallende middelet ennå ikke har begynt å gjenskape.
Forskere kan bruke resultatene til å identifisere spesifikke proteiner som de sporer, og for en rekke andre formål. Å forstå hvordan Western Blot -protokollen fungerer er en viktig ferdighet for noen forskere og laboratorieteknikere, da de må kunne returnere pålitelige og pålitelige resultater ved bruk av denne metoden. Lab ferdigheter inkludert å lære å håndtere komplisert eller bAD -prøver, og hvordan du kan unngå forurensning under prosessen, slik at resultatene av testen er kjent for å være sanne.
Denne teknikken er noen ganger kjent som en immunoblot, fordi i hovedsak de ønskede proteiner er "blottet" med antistoffer slik at de vises. Denne testen kan brukes til å se etter proteiner hos alle dyr, ikke bare mennesker, med veterinærer som ofte bruker Western blot -testen for å avgjøre om en flokk kyr er blitt smittet eller utsatt for BSE.