Was ist der Western Blot?
Ein Western Blot ist eine Laboranalysetechnik, mit der Proteine isoliert werden. Es kann zur Diagnose bestimmter Krankheiten sowie zur Erforschung verschiedener Proteine und Prozesse eingesetzt werden. Bekanntlich ist der Western Blot mit der Diagnose einer HIV-Infektion verbunden, kann aber auch zur Suche nach Spuren von spongiformer Rinderenzephalitis (BSE) und Lyme-Borreliose verwendet werden. Zu Testzwecken mit einem Western-Blot-Protokoll gesendete Proben können abhängig von der Laborkapazität und der Dringlichkeit innerhalb weniger Tage bis zu mehreren Wochen Ergebnisse liefern.
In einem Western-Blot wird die Probe, die aus Blut oder Gewebe stammen kann, zunächst einer Elektrophorese unterzogen, damit sich die Proteine nach Länge trennen. Ein Streifen des Elektrophoresegels mit isolierten Proteinen der Ziellänge kann verwendet werden, um die Proteine für die nächste Stufe des Tests auf ein Nitrocellulosesubstrat zu übertragen. Während dieser Phase wird ein Antikörper in die Probe eingeführt, mit dem Ziel, die Proteine mit Antigenen zu markieren, an die sich dieser Antikörper bindet.
Sobald die Proteine markiert wurden, können sie leicht identifiziert werden. Im Fall von Krankheitstests zeigt das Vorhandensein eines reaktiven Proteins an, dass die Probe positiv getestet wurde. Western Blots geben selten falsch positive Ergebnisse zurück, obwohl dies gelegentlich vorkommen kann, und sie geben möglicherweise auch falsch negative Ergebnisse zurück, bei denen eine Person tatsächlich an einer Krankheit leidet, die sich jedoch bei Western Blot-Tests nicht zeigen. Dies kann insbesondere dann der Fall sein, wenn die Replikation des Krankheitserregers noch nicht begonnen hat.
Die Forscher können die Ergebnisse verwenden, um bestimmte Proteine zu identifizieren, die sie verfolgen, und für eine Vielzahl anderer Zwecke. Für einige Forscher und Labortechniker ist es wichtig zu verstehen, wie das Western-Blot-Protokoll funktioniert, da sie mit dieser Methode zuverlässige und zuverlässige Ergebnisse liefern müssen. Laborkenntnisse, einschließlich des Erlernens des Umgangs mit komplizierten oder schlechten Proben und des Vermeidens von Kontaminationen während des Prozesses, damit die Testergebnisse als wahr gelten.
Diese Technik wird manchmal als Immunblot bezeichnet, da im Wesentlichen die gewünschten Proteine mit Antikörpern „geblottet“ werden, damit sie sichtbar werden. Dieser Test kann verwendet werden, um bei allen Tieren, nicht nur beim Menschen, nach Proteinen zu suchen. Tierärzte verwenden häufig den Western-Blot-Test, um festzustellen, ob eine Kuhherde infiziert oder BSE-infiziert ist.