Cos'è la macchia occidentale?
Una macchia occidentale è una tecnica di analisi di laboratorio che viene utilizzata per isolare le proteine. Può essere utilizzato nella diagnosi di alcune malattie e anche nella ricerca su varie proteine e processi. Notoriamente, la macchia occidentale è legata alla diagnosi di infezione da HIV, ma può anche essere utilizzata per cercare tracce di encefalite spongiforme bovina (BSE) e malattia di Lyme. I campioni inviati per i test con un protocollo Western blot possono restituire risultati in pochi giorni a diverse settimane, a seconda della capacità di laboratorio e dell'urgenza.
In una macchia occidentale, il campione, che può provenire da sangue o tessuto, viene prima sottoposto a elettroforesi in modo che le proteine si separano per lunghezza. Una striscia del gel di elettroforesi con proteine isolate della lunghezza target può essere utilizzata per trasferire le proteine in un substrato di nitrocellulosa per la fase successiva del test. Durante questa fase, un anticorpo viene introdotto nel campione, con l'obiettivo di taggare le proteine con antigeni che quell'anticorpo blocca ON a.
Una volta che le proteine sono state etichettate, possono essere facilmente identificate. Nel caso del test per la malattia, la presenza di una proteina reattiva indica che il campione è risultato positivo. Le macchie occidentali raramente restituiscono falsi positivi, anche se può accadere a volte, e possono anche restituire falsi negativi, in cui una persona ha effettivamente una malattia, ma non mostra i test Western Blot. Questo può essere particolarmente comune nei casi in cui l'agente che causano la malattia non ha ancora iniziato a replicare.
I ricercatori possono utilizzare i risultati per identificare proteine specifiche che stanno monitorando e per una varietà di altri scopi. Comprendere come funzioni del protocollo Western Blot è un'abilità importante per alcuni ricercatori e tecnici di laboratorio, in quanto devono essere in grado di restituire risultati affidabili e affidabili usando questo metodo. Competenze di laboratorio incluso l'apprendimento di come gestire complicate o bcampioni AD e come evitare la contaminazione durante il processo in modo che i risultati del test siano noti per essere veri.
Questa tecnica è talvolta conosciuta come immunoblot, perché essenzialmente le proteine desiderate sono "cancellate" con anticorpi in modo che vengano visualizzati. Questo test può essere usato per cercare proteine in tutti gli animali, non solo umani, con i veterinari che spesso usano il test Western blot per determinare se una mandria di mucche è stata infetta o esposta a BSE.