O que é o Western blot?
Um Western blot é uma técnica de análise laboratorial usada para isolar proteínas. Pode ser usado no diagnóstico de certas doenças e também em pesquisas sobre várias proteínas e processos. Famosamente, o Western blot está ligado ao diagnóstico de infecção pelo HIV, mas também pode ser usado para procurar traços de encefalite espongiforme bovina (BSE) e doença de Lyme. As amostras enviadas para teste com um protocolo de Western blot podem retornar resulta em alguns dias a várias semanas, dependendo da capacidade do laboratório e da urgência. Uma tira do gel de eletroforese com proteínas isoladas do comprimento do alvo pode ser usada para transferir as proteínas para um substrato de nitrocelulose para o próximo estágio do teste. Durante esta fase, um anticorpo é introduzido na amostra, com o objetivo de marcar as proteínas com antígenos que esse anticorpo trava on a.
Depois que as proteínas foram marcadas, elas podem ser facilmente identificadas. No caso de teste de doença, a presença de uma proteína reativa indica que a amostra testou positivo. As manchas ocidentais raramente retornam falsas positivas, embora possa acontecer de vez em quando, e também podem devolver falsos negativos, nos quais uma pessoa realmente tem uma doença, mas não aparece nos testes de Western blot. Isso pode ser especialmente comum nos casos em que o agente causador de doença ainda não começou a replicar.
Os pesquisadores podem usar os resultados para identificar proteínas específicas que estão rastreando e para uma variedade de outros propósitos. Compreender como as funções do Protocolo de Western blot é uma habilidade importante para alguns pesquisadores e técnicos de laboratório, pois eles devem ser capazes de retornar resultados confiáveis e confiáveis usando esse método. Habilidades de laboratório, incluindo aprender a lidar com complicado ou bamostras de anúncios e como evitar a contaminação durante o processo para que os resultados do teste sejam conhecidos por serem verdadeiros.
Essa técnica às vezes é conhecida como imunotransferência, porque essencialmente as proteínas desejadas são "transferidas" com anticorpos para que eles apareçam. Este teste pode ser usado para procurar proteínas em todos os animais, não apenas nos seres humanos, com veterinários frequentemente usando o teste de Western blot para determinar se um rebanho de vacas foi ou não infectado ou exposto à BSE.