Hvad er Western Blot?
En western blot er en laboratorieanalyseteknik, der bruges til at isolere proteiner. Det kan bruges til diagnosticering af visse sygdomme og også til forskning i forskellige proteiner og processer. Berømt er den vestlige blot forbundet med diagnose af HIV-infektion, men den kan også bruges til at se efter spor af bovin spongiform encephalitis (BSE) og Lyme-sygdom. Prøver, der sendes ud til test med en Western blot-protokol, kan returnere resultaterne i løbet af få dage til flere uger, afhængigt af laboratoriekapaciteten og presserende hastighed.
I en western blot placeres prøven, der kan være fra blod eller væv, først gennem elektroforese, så proteinerne adskilles efter længde. En strimmel af elektroforesegelen med isolerede proteiner med mållængden kan anvendes til at overføre proteinerne til et nitrocellulosesubstrat til det næste trin i testen. I dette trin introduceres et antistof til prøven med det mål at mærke proteinerne med antigener, som antistoffet låser fast på.
Når proteinerne er blevet mærket, kan de let identificeres. I tilfælde af testning for sygdom indikerer tilstedeværelsen af et reaktivt protein, at prøven har testet positivt. Western blots returnerer sjældent falske positiver, skønt det kan ske lejlighedsvis, og de kan også returnere falske negativer, hvor en person faktisk har en sygdom, men det vises ikke ved western blot-test. Dette kan være specielt almindeligt i tilfælde, hvor det sygdomsfremkaldende middel endnu ikke er begyndt at replikere.
Forskere kan bruge resultaterne til at identificere specifikke proteiner, som de sporer, og til en række andre formål. At forstå, hvordan Western blot-protokollen fungerer, er en vigtig færdighed for nogle forskere og laboratorieteknikere, da de skal kunne give pålidelige og pålidelige resultater ved hjælp af denne metode. Labfærdigheder, herunder at lære at håndtere komplicerede eller dårlige prøver, og hvordan man undgår forurening under processen, så resultaterne af testen vides at være sande.
Denne teknik er undertiden kendt som en immunoblot, fordi de ønskede proteiner i det væsentlige "blottes" med antistoffer, så de vises. Denne test kan bruges til at lede efter proteiner hos alle dyr, ikke kun mennesker, med dyrlæger, der ofte bruger western blot-testen til at bestemme, om en besætning af køer er blevet inficeret eller udsat for BSE.