Hvad er Western blot?
En Western blot er en laboratorieanalyseteknik, der bruges til at isolere proteiner. Det kan bruges til diagnose af visse sygdomme og også i forskning på forskellige proteiner og processer. Berømt er Western blot forbundet med diagnose af HIV -infektion, men den kan også bruges til at kigge efter spor af bovint spongiform encephalitis (BSE) og Lyme -sygdom. Prøver, der sendes til test med en Western blot -protokol, kan returnere resultater om et par dage til flere uger, afhængigt af laboratoriekapaciteten og det presserende.
i en Western blot, prøves prøven, der kan være fra blod eller væv, først sat gennem elektroforese, så proteinerne adskiller sig i længden. En strimmel af elektroforesegelen med isolerede proteiner i mållængden kan bruges til at overføre proteinerne til et nitrocellulosesubstrat til den næste trin af testen. I løbet af dette trin introduceres et antistof til prøven med det mål at mærke proteinerne med antigener, som antistoffet låser on til.
Når proteinerne er blevet mærket, kan de let identificeres. I tilfælde af test for sygdom indikerer tilstedeværelsen af et reaktivt protein, at prøven har testet positivt. Western blots returnerer sjældent falske positiver, selvom det kan ske lejlighedsvis, og de kan også returnere falske negativer, hvor en person faktisk har en sygdom, men det vises ikke ved Western blot -test. Dette kan være særligt almindeligt i tilfælde, hvor det sygdomsfremkaldende middel endnu ikke er begyndt at replikere.
Forskere kan bruge resultaterne til at identificere specifikke proteiner, som de sporer, og til en række andre formål. At forstå, hvordan Western Blot -protokollen fungerer, er en vigtig færdighed for nogle forskere og laboratorieteknikere, da de skal være i stand til at returnere pålidelige og pålidelige resultater ved hjælp af denne metode. Laboratoriefærdigheder inklusive at lære at håndtere kompliceret eller bAD -prøver, og hvordan man undgår forurening under processen, så resultaterne af testen vides at være sande.
Denne teknik er undertiden kendt som en immunoblot, fordi de ønskede proteiner i det væsentlige er "blottet" med antistoffer, så de dukker op. Denne test kan bruges til at kigge efter proteiner i alle dyr, ikke kun mennesker, med dyrlæger, der ofte bruger Western blot -testen for at afgøre, om en flok køer er blevet inficeret eller udsat for BSE.