O que é clonagem recombinante?
A clonagem recombinante geralmente se refere a técnicas de DNA recombinante. Isso envolve a combinação de seqüências de DNA que não existiriam naturalmente. Essas técnicas também são chamadas de engenharia genética. Segmentos específicos de DNA são isolados e combinados em uma unidade menor de DNA que irá replicar e amplificar o número de moléculas de DNA clonadas.
Os organismos hospedeiros para a clonagem recombinante são frequentemente bactérias. O veículo de DNA usado para a clonagem é conhecido como vetor e geralmente é um vírus ou plasmídeo - um pedaço circular de DNA bacteriano que fica fora do cromossomo bacteriano. Um plasmídeo para clonagem terá uma origem de replicação para que possa se replicar, um local de clonagem e algum tipo de marcador selecionável, como resistência a antibióticos. Isso garantirá a seleção e propagação das células que contêm o clone.
O local de clonagem tem uma sequência especializada que será reconhecida por uma endonuclease de restrição específica - uma enzima que reconhece sequências específicas de DNA e corta os nucleotídeos. O plasmídeo será primeiro cortado, para que seja linear. Os pesquisadores geralmente tentam usar endonucleases de restrição que deixam "extremidades pegajosas" que se sobrepõem e recozem as extremidades do gene alvo com sequências compatíveis no vetor usando ligase, restaurando-o em um círculo. Depois que o gene é clonado no vetor, o vetor é introduzido em seu hospedeiro de expressão, geralmente por um processo conhecido como transformação, e cresce em grandes quantidades. O DNA pode então ser isolado e usado em experimentos.
A clonagem recombinante permitiu a análise de grandes quantidades de moléculas que são normalmente apenas transitoriamente expressas na célula, como mRNAs e proteínas. Isso revolucionou o estudo da biologia. Existem muitas aplicações práticas de clonagem recombinante.
Proteínas como o hormônio do crescimento humano podem ser expressas em grandes quantidades através da clonagem recombinante. Plantas transgênicas estão sendo usadas na agricultura para evitar ataques de insetos e patógenos. Muitos alimentos foram geneticamente modificados para melhorá-los, e as vacas foram tratadas com hormônio de crescimento bovino produzido por clonagem recombinante para aumentar a produção de leite. A terapia gênica tem sido usada em muitas terapias, inclusive para curar uma forma de cegueira. Os animais estão sendo clonados, embora os clones sofram frequentemente problemas de saúde.
Alguns usos da clonagem recombinante são altamente controversos. Muitas pessoas se opõem a ingerir alimentos geneticamente modificados ou a beber leite com hormônio recombinante. Há muita preocupação de que as culturas que foram geneticamente alteradas possam espalhar seus novos genes na flora local.
Algumas pessoas são filosoficamente opostas à alteração das formas de vida existentes. Existe uma condenação quase universal da ideia de clonagem humana. Resta ver se essas novas tecnologias atingirão todo o seu potencial prático ou se a sociedade limitará seu uso.