Co je to hybridom?
Hybridomová buňka je hybridem dvou dalších typů buněk, nazývaných B lymfocyty a myelomové buňky. Když jsou B lymfocyty a myelomová buňka hybridizovány, tvoří hybridomovou buňku, která je schopna produkovat monoklonální protilátky. Pokud jsou protilátky monoklonální, znamená to, že všechny protilátky v daném vzorku pocházejí ze stejného B lymfocytu a všechny jsou totožné. Monoklonální protilátky mají široké použití, včetně diagnostické medicíny a biologického výzkumu.
B lymfocyty jsou buňky imunitního systému produkující protilátky. Buňky a protilátky, které produkují, jsou nezbytné pro zajištění ochrany před bakteriální infekcí, jakož i před infekcí určitými typy virů. B lymfocyty produkují specifické protilátky, ale mají omezenou životnost. Myelomová buňka je B lymfocyt, který se stal maligním, a je tedy rakovinovou buňkou. Myelomové buňky nemohou produkovat protilátky, ale jsou schopny pokračovat v dělení v buněčné kultuře neomezeně dlouho.
Proces vývoje hybridomových buněk byl vynalezen v 70. letech 20. století. K zahájení tohoto procesu je myš imunizována proteinovým antigenem. Myš pak vytvoří imunitní odpověď na antigen, která bude zahrnovat B lymfocyty vytvářející protilátky, které rozpoznávají antigen. Dále se odebere slezina imunizované myši a B lymfocyty se izolují ze tkáně sleziny.
B lymfocyty produkující protilátku se poté kultivují s myelomovými buňkami. Kultura buněk je ošetřena chemickou látkou, která způsobuje propustnost buněčných membrán, což znamená, že jsou přerušovány malými otvory. To umožňuje myelomovým buňkám a B lymfocytům snadnější fúzi. Když se B lymfocyt spojí s myelomovou buňkou, výsledkem je hybridomová buňka. Dalším krokem je izolace nově fúzovaných buněk tak, že každá buňka je ve své vlastní samostatné kultuře. To je nezbytné k zajištění toho, aby protilátky produkované buňkami byly monoklonální a nebyly kontaminovány protilátkami z různých buněk.
Nakonec jsou hybridomové buňky vybrány pro kultivaci na základě toho, jak dobře rozpoznávají antigen, který byl použit k imunizaci myši na začátku procesu. To je důležité, protože B lymfocyty neprodukují přesně stejný typ protilátky, i když byly imunizovány stejným antigenem. Každý B lymfocyt produkuje protilátky, které rozpoznávají antigen s různými stupni specificity a síly; proto se pro selekci buněk produkujících protilátku s požadovanými odpověďmi používá další selekční proces.
Schopnost používat hybridomy k vytváření monoklonálních protilátek proti prakticky jakémukoli proteinu z nich činí mimořádně užitečný vědecký nástroj. Monoklonální protilátky se v biologickém výzkumu značně používají k identifikaci a izolaci buněčných proteinů. V diagnostické medicíně jsou monoklonální protilátky účinným diagnostickým nástrojem, protože je lze použít k detekci bakteriálních, virových nebo nádorových antigenů, které jsou přítomny v malém množství ve vzorku krve nebo tkáně.